细胞传代培养法

liqinzhan

/ t2 D2 Z4 w: }- F, G1、吸除培养瓶内旧培养液  f! V, b3 {: H: ]  o
2、向瓶内加入0.25%胰蛋白酶，覆满瓶底为限
- m# t6 i4 [: t# Z% g3、置温箱中2--4分钟，（或在室温中把培养瓶放在倒置显微镜下观察）当发现细胞胞质回缩变圆，细胞间隙增大后，立即终止消化（加入胎牛血清）
% I( Y3 b4 I# R5 D5 v% w6 R) u4、吸除消化液，向瓶内注入PBS或NS2ml左右，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉，注意加PBS或NS冲洗细胞时动作要轻柔，以免把已松动的细胞冲流失掉
( W: Q# I# c- B* `! [" d5、用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使细胞从瓶壁脱落，形成细胞悬液，吹打勿用力过猛，以免伤害细胞
" ^) C2 P) f: Z6、把细胞悬液分成等份分装数个培养瓶中，置温箱中培养。