大家帮忙看看我的MSC啊

若兰汀

20天传一代有点久，是因为发现它迟迟不能大面积铺板才不传代的吗？如果是这样延长传代周期也没有用，因为你分离时MSC基数本身就小，所以不排除老化的问题。看细胞并不能确定污染，图中央的暗红团状物未必是污染可能是血块或凝固的髓质，我也出现过类似情况。如果你是分离的骨髓MSC，可以初步推断你的细胞中有很多杂细胞，有点铺展很大四周有很多触手状的细胞很像树突状细胞。此外，我发现自己分离的骨髓MSC细胞梭形形态确实不明显，细胞状态也不好，并非营养不够或污染，估计传两次代后，细胞纯度高了，铺板面积大了就会好了，贴壁细胞的集落性很强，基数达到后，生长状态就会好起来。

布谷2010

回复 9# masl , E4 E; p- A7 Z* B( p

+ i' k! D6 |7 z9 x1 ^
# B7 ], R+ l: a4 I& b9 [5 U    我也这么想的啊哈哈

dengyuan9

算你倒霉吧

shiqingxi

可以密度高一点 看看状态能不能回来

布谷2010

回复 11# 若兰汀 7 R, z  A1 M6 d; e) b  P

" N. H8 V4 s+ X0 F
/ O3 f2 k7 z' o+ E3 }9 V4 B+ K    你好，谢谢你的分析啊我想问一下，过早老化是因为一开始原代细胞数比较少吗？还有杂细胞多是什么原因呢？

andyz0922

我的也这样 啊   不知道为什么  已经很小心了 但还是会这样 原来以为是饥饿的问题呢 郁闷

andyz0922

如果 接种的时候 细胞过多 又会  在消化时候  成片下来  不知道这样的细胞还能不能用来试验呢

若兰汀

回复 15# 布谷2010 / D6 U4 S  n1 l/ z
4 z6 E2 U3 Q2 N: a6 r
你的细胞不能说是老化，长的慢或形态不明显都不能证明是否老化。要是老化了应该是接近凋亡状态的，比如细胞首先变圆固缩，胞内有凋亡小体等等。老化的原因有很多种吧，传代次数多，培养时间过久，培养基营养不丰富，酸碱不平衡等等。如果你是刚分离的细胞，尤其是原代，就是很难看的，而且生长缓慢。因为自己分离，肯定会有骨髓造血干细胞，单核细胞，血细胞等掺杂，一般大家会用Ficoll分离液，或是多次传代来逐渐去除杂细胞。如果你的实验对细胞纯度要求很高，建议买细胞株吧。自己分离周期很长，难度也很大，而且骨髓间充质干细胞含量很少的，尤其是小鼠的很难培养。

霄子

回复 3# 皮搋子
( O' J' f- @, c! E/ U- [( Y% m' k2 A- A3 q7 w% {' Y

# j4 b& J( [; l! y    请问杂质细胞过多，传代的时候怎么纯化呢？请教请教！

cheese

细胞量不够，传代会不会受影响啊?