求：“腺病毒转染骨髓基质干细胞”的相关问题？

dengyuan9

我做的腺病毒转染骨髓基质干细胞，采用了百度文库里的建议，先用无血清无双抗培养基，病毒滴度未知，病毒液与培养液比例1:9 。 6个小时后，准备改换成含10%FBS和1%双抗的alpha MEM培养基，可是，观察时发现六孔板内，三种状况并存，一种是细胞和味转染前的状态一样，一种是镜下见不到任何细胞，另一种是许多细胞碎片，未见正常形态细胞，三种情况的面积大小相近。
; F- \: U" P7 _: I2 d* `7 N+ [+ w       请问：这是怎么回事？因为有中科院的同学说，腺病毒转染最好在90分钟左右，且不需用双无培养基。难道是我的转染时间过长？不应该用双无培养基？! w: C5 z# t0 d
             我的转染病毒了是否过大？现在用的是病毒液与培养基是1:9

daviddow

我个人感觉还是觉得你测定一下病毒滴度。要是不测定，你最好是大剂量转染。你那个有没有标记，像GFP的？

dengyuan9

回复 2# daviddow . q6 |$ M( ^" o5 o
4 @: B7 N. R0 Y0 I0 u
+ C& |9 _. T+ _' z, z- y3 v6 L
    我有和目的基因一样的腺病毒，带有GFP的，但是含目的基因的腺病毒没有GFP。
% M6 B$ |  i+ W3 O: B5 @   还要加剂量？这个十分之一的病毒液已经够多的了啊。
( q: D. k6 R# W0 y6 e   测病毒病毒TCID50的试剂盒一般都3000左右，我不想在不知道病毒好不好用的情况下就花钱测它的滴度，这个病毒是别人赠的。