干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 46427|回复: 12
go

求助:羊水原代培养(附图)   [复制链接]

Rank: 2

积分
89 
威望
89  
包包
597  
楼主
发表于 2010-11-8 10:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2010-11-8 11:09 编辑
/ Q; @0 w3 p, D: c9 p# e7 m2 `$ j& U3 n
妊娠中期羊水原代培养,目的,分离鉴定得到羊水间充质干细胞。培养8天后,细胞培养皿中出现如下细胞,请教下,这些是我要的间充质干细胞吗?顺便推荐些需要鉴定的细胞表面抗原,打算用流式鉴定。谢谢
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
194 
威望
194  
包包
559  
沙发
发表于 2010-11-8 11:14 |只看该作者
哥们 羊水干细胞不是个好东西  趁早 洗洗睡吧

Rank: 2

积分
89 
威望
89  
包包
597  
藤椅
发表于 2010-11-9 08:22 |只看该作者
自己顶一下,看了别人的羊水干细胞图片,跟我的差好多啊,不知道我养的到底是什么,请高手指点,谢谢

Rank: 2

积分
89 
威望
89  
包包
597  
板凳
发表于 2010-11-10 09:20 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
自己再顶一下,看了别人的羊水干细胞图片,跟我的差好多啊,不知道我养的到底是什么,请高手指点,谢谢
. ?% W6 @$ _* g# l% R本文来自干细胞之家  - 中国干细胞研究员的交流论坛http://www.stemcell8.cn,详情请看:http://www.stemcell8.cn/thread-29692-1-1.html

Rank: 3Rank: 3

积分
907 
威望
907  
包包
2437  

优秀会员 金话筒

报纸
发表于 2010-11-10 15:00 |只看该作者
首先,从图上没有办法定论是什么细胞,也没有见集落形成,所以可以怀疑不是干细胞;
* T4 \# _/ k% s$ D3 M/ t其次,间充质干细胞的鉴定也不能用一种方法就可以下结论的;3 ^% w, g) E, ?" F
     建议把细胞传代一下,最好能把密度提高(可以合瓶,也可以放到小的培养器皿中,也可以把培养瓶倾斜培养等等),密度太低细胞的生长周期太长,容易变化。
- W) S" Z! H& f6 v% H# O: N4 J
+ p2 f9 `" K0 i6 d顺便说一下间充质的鉴定
" e: t2 W$ ?: _2 V
) B9 X. [; y* T一、从形态上看,长梭形,漩涡状生长;
5 k7 U; i" v3 d  K: v: a二、表型上CD44、CD29、CD166、CD90、CD73阳性,如果不全测建议可以测CD44、CD29;
) j0 H9 X* E) H' @三、免疫组化或免疫荧光测波形蛋白,波形蛋白阳性,测CK19,CK19阴性
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
89 
威望
89  
包包
597  
地板
发表于 2010-11-11 08:56 |只看该作者
学习了,谢谢!

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
289 
威望
289  
包包
880  

优秀版主

7
发表于 2010-11-18 13:56 |只看该作者
羊水来源的细胞贴壁的有三种:上皮样,成纤维样,还有就是羊水特异细胞,你的细胞形态多样是肯定的,如果纯化,就要免疫磁珠法最好
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 1

积分
16 
威望
16  
包包
278  
8
发表于 2011-5-31 09:04 |只看该作者
这是我羊水原代培养得到的细胞,已经传到20代。  N* W3 |/ N! j: Q
用荧光定量PCR做了几个鉴定指标:7 \" `. u+ Q! ]( A
       CD45,CD29,CD73,CD44,CD166,CD105,CD90,OCT-4 表达 ! I; r9 T! g- N4 h/ C  `: O. y
    CD34,CD14 未表达
8 u3 X0 e; H" U0 Q* _0 O1 e: ~由于经费问题,没有做流失鉴定,三系分化鉴定也只打算做脂肪分化。3 X# A' A& P% T1 I$ ]# c
7 b  t$ x4 _" q8 z9 v9 S# _! E
各位培养过羊水间充质干细胞的前辈们,我的这个细胞像吗?
附件: 你需要登录才可以下载或查看附件。没有帐号?注册
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
329 
威望
329  
包包
787  

优秀会员

9
发表于 2011-5-31 10:00 |只看该作者
间充干鉴定主要CD73,90,44,105,29. 阴性可以做CD34,45,11b,31
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3648  

小小研究员

10
发表于 2011-5-31 11:41 |只看该作者
回复 zg_zj_hz_xyj@ya 的帖子- ~% I* e: k1 s! S' \
: R6 |5 h  Y6 n9 r3 p2 L
建议你发一个新的帖子提问
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-5-4 07:49

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.