明胶包被细胞板的注意事项

hhchen418

问题1：0.1%明胶的灭菌方法？是用过滤除菌法好还是高压灭菌法好？# T+ g& k% J0 }
问题2：明胶包被细胞培养板之前需要置50～60度预温吗？本人每次包被之前都放50～60度温浴10～15min，会不会多此一举？是不是置室温平衡之后直接包被细胞板就可以了？

hongjie88

高压灭菌，不用温浴

decloud2009

我们一般都是配个250ml，高压灭菌，每次都在生物柜里打开，大概过个一两个星期如果还没有用完，就再灭。4 Z5 l2 H3 E; A$ I
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还有没有必要温浴啊，只是细胞板，又没有细胞。就是在使用之前要保证细胞板表面不会干燥就行。

tangxiao

回复 1# hhchen418
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   高温高压灭菌；
: [; K! C. n9 Z" }/ Y" P6 e/ {  铺板后，细胞培养箱放置半小时或过夜；用之前吸尽明胶液，风干（5分钟左右）！

lfate

不需要风干

懵懂干细胞

我就是明胶跟胰酶等物一起放37度水箱里面预热15-20min就可以了，开始操作第一件事情就是将明胶先铺好，消化期间将多余的明胶吸取出来就可以了，离心两次后就直接用着呢！没发现多大问题啊。用得着风干或者56度预热吗？不过我认为即使你风干预热等等都做的话对细胞的负影响应该也不会很大，就是操作细节花时间太长污染概率大点吧！

bunny19870512

我是一次配个100ml ,高压灭菌,要不那个东西也不太好溶.高压完了立即转入无菌室的柜子里,室温放置.用的时候拿出来直接铺板.没有预热那一步,预热是不是想让明胶粘的更好?因为我们通常都铺了八个小时后,才铺细胞,所以室温就够用了.

hhchen418

我买的明胶说明书上说，明胶在100度不稳定，所以我觉得置于50度水浴溶解之后再过滤除菌应该是最好的；另外，由于明胶粉末在冷水中不溶，在温水中溶解形成透明溶液，溶解后在冷水中形成凝胶，所以我从4度冰箱取出明胶溶液之后，一般都放置50度水浴温浴10min左右，之后摇匀，我个人觉得这样做可能更好些。

smkx

http://www.stemcell8.cn/viewthread.php?tid=26499&extra=

abu2008

gelatin 无有毒物质 不需风干 灭菌直接包被15min以上就好