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[请教] 请教一下关于培养基中的碳酸氢钠 [复制链接]

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楼主
发表于 2010-8-8 10:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问基础培养基中不含碳酸氢钠的培养基,培养细胞时用不用添加碳酸氢钠?, Q6 q0 m  M: T. b
如果用的话,是用化学试剂的那种,还是有专门用于细胞培养的碳酸氢钠?" L' B5 p( R& E$ `9 ]
还有碳酸氢钠的作用是什么?谢谢
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沙发
发表于 2010-8-8 15:29 |只看该作者
粉末培养基配制(以1 升为例):细胞培养基通常须添加10 % 血清,因此粉末培养基之配制体积为900 ml,pH 为7.2 - 7.4。NaHCO3 为另外添加,若将NaHCO3 粉末直接加入液体培养基中会造成pH 之误差,或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2 气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH 易发生改变。NaHCO3的作用:培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统,并采用开放培养,使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶,再通过稳定调节温箱中CO2浓度(5%),与培养基中的NaHCO3处于平衡状态,从而调节培养基的PH值。
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藤椅
发表于 2010-8-8 19:37 |只看该作者
请问基础培养基中不含碳酸氢钠的培养基,培养细胞时用不用添加碳酸氢钠?
' [6 R1 G$ |+ I2 Y+ H  Y4 v如果用的话,是用化学试剂的那种,还是有专门用于细胞培养的碳酸氢钠?还有碳酸氢钠的作用是什么?
5 C' O) f- r8 Q3 g) l- o- W  C7 b简要回答这几个问题:1.需要添加,原因见三;
7 W# b8 ^% J1 X! D2.细胞培养要求条件较高,建议使用级别较高的NaHCO3,普通的化学试剂级的一般不太好,纯度上还是有些问题,我就见过黑色的杂质;, ~  `5 f3 Y* g; g/ D4 ?2 r
3.作用是起一个缓冲的作用,细胞培养过程中我们经常会看到其细胞培养基颜色发生改变,这就是其酸碱度变化的原因,NaHCO3是一种重要的缓冲剂,能够使其PH不致改变特快!
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板凳
发表于 2010-8-9 08:39 |只看该作者
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请问大家使用的是哪种的碳酸氢钠呢?是什么哪个厂家的?因为我用的普通的化学试剂两次细胞都污染了,不知是不是碳酸氢钠的原因。

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报纸
发表于 2010-8-9 10:37 |只看该作者
碳酸氢钠主要作用就是PH缓冲!

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地板
发表于 2010-8-18 13:47 |只看该作者
我们用的也是化学试剂的 得先配制 然后高压灭菌 在过滤一遍 也没污染啊
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发表于 2010-8-19 09:51 |只看该作者
回复 6# huijinyu621
  ^, u& _, e& j/ \' _
/ R- l! N8 g! ~' ~  r7 A9 j/ k3 Q
: x$ h3 R* {% y' Z  y/ V6 G  f    你们的细胞培养基配好了灭一遍?????????里面的东西不会变质么?

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优秀版主 金话筒 优秀会员

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发表于 2011-7-18 10:30 |只看该作者
如果配制F12培养基,1L的该加多少碳酸氢钠可以达到pH7.0-7.2。
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