求助：新配置的培养液迅速变黄？？？？

SVZ

大家好，我最近在尝试做小鼠成体SVZ区的神经干细胞培养，在我配液过程中发现我的培养液在配置过程中迅速变黄，不知道这是怎么回事？
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培养液的配方如下：. ]( i0 l; _+ d; z
DMEM/F12(50ml）+bFGF(1Oul）+EGF(10ul）+B27(1ML)+N2(0.5ML)+L-Glutamin（0.5ml）
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除L-Glutamin外，其他都是invitrogen公司购买的。0 e9 T( F2 t3 D1 p* e1 H' s. h& [
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基本上是东西一加进去就黄了。但是液体放置多天还一直很清亮，所以基本排除污染的可能。
' K* @9 N7 F0 `! u: l我后来发现我分装的N2（-20度保存）冻液的颜色很不均匀，白一块黄一块的，我起初怀疑是N2变质的原因，就不加N2又重新配了一次，可还是很快就变黄了。我估计是PH值发生改变了，不知道这是否正常。各位同道是否遇到过这种情况？该如何处理？恳请高手指点，谢谢！

xiaojunhu1985

回复 1# SVZ) |0 K$ n* i7 L4 m
在配置过程中，应该要避光。有没有避光啊？

zsc78

不知道你说的发黄到什么程度，因为像DMEM/F12本身的颜色就不是很红，有点儿棕色或棕红色（也不知道怎么形容），没有DMEM那么红，如果是这种就没有问题。如果是特别黄，就请检查你的添加物。因为细胞因子有些说明书是说用一定浓度的乙酸溶解，如果是这样就肯定发黄。

SVZ

谢谢楼上朋友的指点！- r) c2 n; B* L' R/ M3 Y
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我在配制的过程中没有避光，因为几乎所有的试剂除DMEM/F12外，都没有专门要求避光，DMEM/F12有要求说避光，但是大家经常放到玻璃门的药品储藏柜经常见光，但还是很好用。2 [( p8 {* S" Q

- Z) s  k% k9 x- C至于发黄的程度，黄得有点像很稀且清亮的蜂蜜，稍微透一点点红。我添加的细胞因子的稀释都是按照说明书来的，说明书中没有用乙酸溶解的特殊要求。

hualin840518

这基本上是正常的
3 o. L* Z* L* r; d' B2 C培养效果没有什么变化吧
4 [2 W4 R) t  A, {6 ^“黄得有点像很稀且清亮的蜂蜜，稍微透一点点红”% |3 Q4 F; s; K$ {+ U
可能是在培养液里面添加其它成分后
' K: W% p9 o( ~  i% }PH值发生了改变所致4 J) s9 q$ z8 H" a& Y# I
照你的描述，应该没有沉淀生成！

cortex

这可是正常的，当你加了L-glutamin和B27及N2后，变化一点颜色（不应该说是黄色吧，不过和蜂蜜有点像）是正常的。你是否发现用着用着，他又会变红。

SVZ

非常感谢，这下我心里就有谱了。% |7 [) I) r1 }# i' j
确实没有沉淀产生，也确实加在细胞培养皿中放到培养箱培养后会变红一些。但是4度保存的培养液一直是发黄的。0 S( J+ f# U# M8 |- {1 o
因为是新手，不知道是否必须调PH值才可以用。现在我决定再培养一批细胞，看一下情况吧。
# R6 l  O! v6 w( r$ [再次感谢！

SVZ

给大家汇报一下吧，培养液变黄，但是对我的后期细胞培养没有产生什么影响，多谢大家指点。

jennyshy

正常的颜色，我以前用pH计测过，pH7.2-7.4，用着用着就变红了。

huangfei2010

回复 6# cortex 9 w& O$ U3 x, @2 J; r" T. T, J; `5 {- f( P
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5 m/ V9 H- U* c+ X) |2 k
    这位师兄，我就遇到和你说的情况一样，刚配好的培养基颜色有点淡黄透亮，加到细胞培养瓶中一夜就变成粉红色的了，感觉细胞在这个粉红的培养液中张的不好啊，请问师兄你有遇到这种情况吗