MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？肌纤维细胞，神经纤维细胞？

上海过客

MEF 到底是一种什么性质的细胞？是单一的细胞？内胚层细胞，肌纤维细胞，神经纤维细胞？ 是 均一还是不均一的细胞 ？3 ?3 ?5 }8 G6 V* b
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越做 越有疑问 ，这种细胞 的性质到底是什么样的 ？5 g& t) I% E0 j$ j, F/ X" i

. M! `4 h! t# Q谁能给一篇综述。或者谈谈 MEF细胞的 特性 ？

shewawa

回复 1# 上海过客
- m) z* E" d6 [- S* {+ u8 w
% u9 R7 _7 |0 }+ {MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。
1 f: n3 j+ i' f, F  r% I( ^- h3 @% j; w+ M7 l! I
不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是个很残忍的试验。这个细胞取自老鼠胎儿，去掉手足头尾巴及内脏，磨碎以后进行贴壁培养，随着元代培养的结束血细胞应该死亡，所以个人认为细胞是个混合细胞，有可能包含神经细胞，表皮细胞，但是没有内脏细胞和脑组织细胞，主要成分可能还是纤维细胞。+ b  b5 R" S) D1 B/ P0 C

  e# a. _2 I6 v我也对这个细胞有疑问。据说这个细胞对nestin神经抗体呈阳性，不知道楼主是不是也看见这个结果了。请问这是什么原因呢？

白衣小彩

实验用作饲养层制作的主要是成纤维细胞，主要选择12.5-14.5dpc鼠胚纯度较高，培养时肯定会一些杂细胞主要是上皮细胞，它分泌的细胞因子有助于ES/EG在体外保持未分化状态。

wangzhuo822001

开始有杂细胞，但是培养两代后应该就都是成纤维细胞了～～

songzxj

那有没有分析过，这种分离出的MEF中，成纤维的比例有多大呢？非成纤维的成分又是什么？

xjya

回复 5# songzxj
1 ]! p. R! b* }6 B9 e
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    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特异性抗体。

xjya

进一步看，MEF 100% a-actinin，sm-actinin和CD31染色均为阴性，说明应该不是内皮细胞或是肌细胞。另外从形态学看，MEF也可以与内皮细胞区别，前者呈长梭形，后者是鹅卵石样细胞。神经细胞我个人认为在MEF培养的条件不会存活。( ?! }* L  u' w3 @! _& [
另外公认的MEF原代培养 是取12.5天左右的胚鼠，这个时间点应该是基于大量研究证实的获得MEF 的最佳点。

上海过客

回复  songzxj
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- x, h% v4 y7 Z" F7 O% k    我做过MEF的染色,100%都是vimentin阳性细胞。当然，vimentin不是fibroblasts 的特 ...3 J0 N3 B9 y# S# X, P
xjya 发表于 2010-6-30 16:54

' c* M4 N5 \  p. i/ N  b  @+ U. Y! p

" n# G4 U$ }- T谢谢  传几代也是 这样吗 ？  Vimentin  是 间充质 干细胞的  MARKER 吧 ？
0 g# r0 X& y9 I4 y- J
+ {+ I! w+ e' @! D这个 的确是  非常令人  迷惑  。 既然是间充质干细胞 里面 可能会存在  多能干细胞 。

上海过客

回复  上海过客 1 L5 q# t" C% \
8 P& ]7 U8 A% K$ Y. u# @
MEF 是Mouse embryonic fibroblast的略称。
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6 X+ z$ @! n3 j不知道楼主做没做过MEF细胞的制作，这是 ...! `( ~3 ^' i; l
shewawa 发表于 2010-6-30 14:28

做胚胎干细胞的没有不做MEF 原代培养的吧 。, [. i$ a  s0 F) ^9 _" K
) ]& `8 c% ^- Z# b0 Y
我 怀疑的问题就是  MEF 是不是 均一的细胞，是不是 有多能性的干细胞存在 。7 q  @/ K$ V) _
, M. \5 o7 Q3 }& F4 B/ U( E1 s
最近PNAS 有一篇文章似乎 也 提出这个问题了，间充质细胞里存在有多能干细胞。

上海过客

以上结合我另一个帖子 。可能 MEF  PCR  扩增 出来 OCT，NANOG，Sox2  是 对的 。
  e& \: m% z: W1 A! s/ t& U/ e) E" b
扩增不出来 反而 是  有问题的 。