ACS子刊：新开发的Immuno-CRISPR测定方法有望更早地检测肾脏排斥反应

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ACS子刊：新开发的Immuno-CRISPR测定方法有望更早地检测肾脏排斥反应4 K& M& D# F# T
1.        活组织检查
; G: ?6 ~& {; n1 e1 h/ W/ S2.        肾脏排斥$ p# ~: V' \0 r6 C+ Y8 D8 E
3.        生物标志物2 z4 _* E9 E3 h3 y0 D/ V
4.        ELISA
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6.        CRISPR
- {2 u. `6 V6 i7 @- T$ w5 V0 \7.        Cas12a4 `3 Y  ?: @/ p% t" ~
8.        DNA条形码* [# J' r+ h, G! q
来源：本站原创 2022-01-16 15:03
6 X& j" k) m6 \$ t; A6 z: Z在一项新的研究中，来自美国伦斯勒理工学院和西奈山伊坎医学院的研究人员开发出一种基于CRISPR的检测方法，它可以灵敏地、无创地检测尿液中的急性肾脏排斥的生物标志物。有朝一日，这可能有助于在不进行活组织检查的情况下，更早地诊断出排斥反应。) p0 R. ?% C6 `
2022年1月16日讯/生物谷BIOON/---当患者接受肾脏移植时，医生会以多种方式仔细监测他们是否有排斥反应的迹象，包括活组织检查。然而，活组织检查是侵入性的，而且只能在晚期阶段发现问题。如今，在一项新的研究中，来自美国伦斯勒理工学院和西奈山伊坎医学院的研究人员开发出一种基于CRISPR的检测方法，它可以灵敏地、无创地检测尿液中的急性肾脏排斥的生物标志物。有朝一日，这可能有助于在不进行活组织检查的情况下，更早地诊断出排斥反应。相关研究结果近期发表在Analytical Chemistry期刊上，论文标题为“Highly Sensitive Immuno-CRISPR Assay for CXCL9 Detection”。
3 Y0 |  _4 W! ^6 k3 ]+ f, Y肾脏移植受者必须在余生中服用免疫抑制剂，以帮助他们的免疫系统不攻击外来器官。然而，肾脏排斥反应仍然可能发生，尤其是在移植后的头几个月，这被称为急性排斥反应。迹象包括血清肌酐水平上升，以及肾脏疼痛和发烧等症状。
0 E/ s& m/ _. B' A  B! g目前，明确诊断肾脏排斥反应的唯一方法是通过活组织检查，但是这种方法只能在相对较晚的阶段发现问题。能够在早期阶段敏感地、无创地诊断出肾脏排斥，将使医生能够更早地启动抗排斥药物治疗。人们此前已发现，肾移植患者尿液中一种名为CXCL9的细胞因子蛋白含量高，是排斥反应的早期预警信号。但目前测量CXCL9的方法---酶联免疫吸附测定法（ELISA）在尿液中的效果并不好，限制了其敏感性。因此，论文通讯作者、伦斯勒理工学院的Jonathan Dordick博士及其同事们想开发一种更灵敏的技术，从尿液中无创地诊断急性肾脏排斥。, y9 \8 q* b. B* m/ \8 w
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DNA条形码I和II的示意图，图片来自Analytical Chemistry, 2021, doi:10.1021/acs.analchem.1c03705。( |4 x$ `7 l+ y* s, a. t
这些作者将他们的检测方法建立在CRISPR/Cas12a基因编辑技术上。在CXCL9蛋白存在的情况下，CRISPR/Cas12a酶切割探针，产生荧光信号。他们通过附着聚集大量CRISPR/Cas12a分子的DNA条形码增强荧光信号，该条形码随后与识别CXCL9的抗体结合。
  ~2 B+ X! ?$ C: |! R) T5 q: `8 @5 J重要的是，与其他基于CRISPR的检测方法不同，这种新的检测方法不需要进行PCR扩增，这使得它更容易适合于在医生办公室甚至患者家中使用的设备。在对11名肾移植患者的尿液样本进行测试时，这种新系统准确测量了CXCL9的水平，测量的数值与ELISA非常相似。然而，这些作者说，由于这种immuno-CRISPR系统的灵敏度比ELISA高约7倍，它可能能够在非常早期的阶段检测出肾脏移植排斥反应。（生物谷 Bioon.com）( G8 [; Q' l* [2 L  C, z
参考资料：
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Inseon Lee et al. Highly Sensitive Immuno-CRISPR Assay for CXCL9 Detection. Analytical Chemistry, 2021, doi:10.1021/acs.analchem.1c03705.
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