脐血MSC和红细胞裂解液的讨论

mbpsky

请问一下战友们9 D8 r0 |1 O+ H) o1 `, ~
你们分离MSC时脐带血用红细胞裂解液吗？
1 L7 ]0 E% x( j- [请用的战友介绍一下配方和用法
$ a* Z# F! R" g, a9 b# Q7 S先谢谢了！

echo

养间充质的时候，不用裂解液也可以的。脐血分离后红细胞是挺多的，但是直接贴壁来养间充质没有什么问题。

mbpsky

回复 2# echo 6 ~& L! h+ U4 k! C

9 o0 o' }" w- b# M6 z/ K) ^( G% v$ K7 v% \' p  i
    直接贴壁效果不好吧，细胞不纯...尤其是脐血的..都是幼细胞，贴壁能力也很强的

Robert-A

养MSC不用裂解液，如果你想用的话可以用氯化铵或高渗氯化钠都可以的

echo

回复 3# mbpsky 1 N  u& S/ F8 Y

+ W7 ^' \# \7 P0 `' t2 K$ y) v3 o4 T+ ]6 c" I1 i0 h) o8 e0 |
    摸索换液时间应该还可以。

willow0711

回复 Robert-A 的帖子0 {& ^+ E/ [$ s- Y; m
$ o7 a/ w0 i; ^* m( t7 x
你好，请问你说的氯化铵或高渗氯化钠的具体浓度是多少？怎么配置？作用是多长？谢谢

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓还低

金戈

氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）( r% u7 m$ k% {. I) ~
80.2 g NH4Cl (1.5 M): X8 f; ?7 t5 P6 [& F4 T( S. `& ?2 A% t
8.4 g NaHCO3 (100 mM)
" ~, @, Q1 O" D# s" s: I* S* q6 b3.7 g EDTA二钠 (10 mM)
! o! ^+ j& x" z- p/ F( t9 S加水至900ml，然后用1N的HCl或1N的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。
, ^8 }: P" x' Z. B该10×的储存液可在4℃保存6个月。
8 }* n* G: {+ T; n& k: b工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓的还低，所以有可能会分离不成功。

jxaf3900824

可以不用红细胞裂解液，贴壁生长挺好。$ z- U- X3 m. S0 d. r