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请教 间充质干细胞的体内示踪 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-5-6 21:55 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近做大鼠间充质干细胞的体内示踪,我们用Hoechst和CFSE标记好细胞后,通过尾静脉注射移植,但2天后在肝、脾、肺、肾、骨髓冰冻切片均未见到阳性标记。请教各位是细胞未到达上述器官,还是荧光淬灭了。我们同时在体外培养了标记的细胞,生长状态良好,荧光也很清楚。
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沙发
发表于 2010-5-6 22:32 |只看该作者
你们的细胞数是不是太少了啊,你们打了多少啊?还有顺便问一下,为什么要Hoechst和CFSE双标记啊?我们标记只用了CFSE,这个HOECHST是什么作用啊?我也做SDa大鼠的体内和体外,我只用了CFSE
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藤椅
发表于 2010-5-6 22:36 |只看该作者
还有是不是时间太短了啊,一般我们选择第10天检测,你检测什么啊

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板凳
发表于 2010-5-6 22:38 |只看该作者
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2-5*106,Hoechst标记细胞核,因为我们体外实验发现它标记细胞的时间可到两周左右,而CFSE最多1周左右。请部bypw你们的结果如何?
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报纸
发表于 2010-5-6 22:56 |只看该作者
是啊,cfse最多传9代,我们下周准备做活体成像啊,体外还可以啊,没有问题,还不知道体内怎么样啊?你们怎么想到用双标记啊,你们有什么考虑吗
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地板
发表于 2010-5-6 22:56 |只看该作者
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包包
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发表于 2010-5-6 23:06 |只看该作者
回复 6# bypw . @! K9 ?, H7 q/ I/ Z- [

$ @" q! W' L/ t" a7 F+ _( z8 I
; i( H3 f3 H1 C# T0 b7 o0 U* F, T    我也在做间充干的示踪,请教两位用哪种方法比较好?我想试试菲立磁标记·····

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发表于 2010-5-15 17:07 |只看该作者
我用BrdU

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发表于 2010-5-16 10:50 |只看该作者
回复 1# zhangl
3 n! s6 D* m7 z6 H5 m
; M# p0 d* d/ V6 {) U$ nCFSE很容易标记不上的,而且毒性也不小,细胞容易死,一定要控制浓度。是否做了检测?
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发表于 2010-5-16 14:20 |只看该作者
哈哈,也准备侨这方面的,谢谢大家的讨论了
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