ips中的疑惑（附图）

小刀

3 K+ v4 Y9 u, k

4 x; V7 T  T- X5 X7 C6 S1.培养过程中见到很多网格状结构：不知道是什么原因，我猜想是不是细胞老化：
4 a1 m' K$ ]4 z2.最近几日又见培养皿中出现如图状结构，我猜想是不是ips的克隆，但是ips的是圆的，而且周围有细胞环绕，但我的是不规则形状却没有，很像成片脱落的细胞。我想我肯定是想克隆想疯掉了！
8 M2 b& P8 V' @3 b: `, c$ ?4 g# ?8 A3.刮取了少许2中片状结构，转至24孔板中，第三天，细胞漂浮不见贴壁见图： 前辈指点，谢谢

jiejesse

你的很有可能是所谓的carcinoma stem cell，可能是你的操作过程中细胞癌变了

dwc326

第一幅图很像我们药物筛选的HeLa长期培养后的样子。
( d( c3 ?" a2 U) R3 Z首先你这个细胞是不是传代次数太多，细胞老化了？
* N! o8 H, @4 Y# P5 I+ z第二传代后留下的细胞是不是太少了？因为如果传代后留下的细胞太少，缺少必要的细胞与细胞间联系，细胞生长缓慢，那一团团的东东貌似是单个细胞的克隆，等长满了，中间的已经挂了。刚学习养细胞时师姐告诉我的，仅供参考
1 b+ }2 e+ x" E是不是IPS还得坚定吧，不能光从形态上判定啊，丢在软琼脂里培养个个都是球，还都是单细胞克隆球呢

xyzengh

有时候细胞不完全重编程会出现图一的那种情况，你可以试试在这些细胞上再次感染病毒会不会有奇迹发生；如果不看边缘，我很喜欢你第二张图的“iPS细胞”，可惜...；第三长图看起来不像，但我告诉你，不是所有的ES/iPS细胞传代后都会贴壁，传代时加入Rock inhibitor会不会有改善，如果打得过散传代后几天内都看不到明显的克隆，耐心等几天看看。
; ?5 o2 E2 C( h$ Z# q' u0 f8 v如果这些都不行，请你参考细胞海洋超版刚刚转的我写的protocol，两种病毒体系都是我亲身试过并成功地，重复性很高，如果你所有试剂和操作都没有问题的话，我等你的好消息！

Jonathan

回复 1# 小刀 7 [5 R6 q/ Y  u& s, ~

- S7 n+ ?+ u* D2 @第一个图片，转了4因子？感觉形态变化，好像c-myc加多了一样。第二个图片，一看就知道不是ips啦。长成那样，还要挑来干嘛。ips在低倍镜下可能跟你那个看起来有点像，但是高倍镜下，我敢说LZ的那些，肯定不会很紧凑。第三个图片就不知道了，没做过。没法评论。+ }4 Q, m' W4 I# L+ n# }

( V7 ~& r& ~( B# I至于2楼说的是carcinoma stem cell，不敢苟同，单凭形态没法判断，那些也有可能是多倍体，多倍体也会长成那样。也有可能是一些基因的表达不平衡导致（此说法只是猜想，没有经过实验验证）。

lorey

学习了！

friendly0722

要是有放大的图片看看就好了，

细胞海洋

要是有放大的图片看看就好了，7 x, b9 O1 x  U& ]; M' p
friendly0722 发表于 2010-5-10 18:29

. D; l. b8 _8 Z. q0 k- u; q
+ V8 w7 [2 Z& y' \5 X( I

5 x; P- ~1 f0 l% `4 {    点击图片 可以看原图

精检人生

努力学习！感谢大家！

双刀

楼主的是感染了几天的细胞？是人的还是小鼠的？3张图都不像ips