PGC的培养 补充中

ellapan

欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂+ B5 p' l" |- p. z) }6 D

- a/ x" Q$ ~& A4 C如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章
; S+ f0 f+ [0 c7 q& ]1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture
! ]6 W$ B- R2 h6 v1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP% ~& f( p7 ^4 @
1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth0 y" D# V8 `% {( o; T
1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System- C1 L1 G7 \9 C! U. h. |7 d; w
1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro. w' T% v& `4 Q8 @# e
1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures
) Q5 o' A+ ]* \, _( V) y1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata, }8 t6 @. X9 V: t1 `- N, _
1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth
' e/ C/ R- i& {# e' ~+ j4 G2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development/ c1 Q* M: Z/ O, p1 K4 }# [1 J$ a
2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse* Z& p1 h3 s/ _5 c+ _0 l
2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
* }5 o* X+ ?& u% ?$ r2001 Twenty years of research on primordial germ cells
* l* I, X! _7 T2 e# J7 `9 b) W2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro
" c6 N, Y$ M& U2003 Primordial germ cells in the mouse
# L1 ~2 ?/ _: f0 d2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz& E1 ~( q. `' N! }0 w- H( Z
2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation
. K1 p, ^6 P$ r9 k2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo
  z8 G) K' x/ H2 @& ^2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation8 s( B8 H2 ]' t, J0 V! r0 N
2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival
" R2 R" K4 F( y  G: V+ |: _' U2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.& O" |& j2 |1 m$ B0 ]$ b; Y
2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells
% \, [" S1 w: {" h% n& j+ ?4 f% F' i* g
上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看

jiejesse

很好

ppcl2

/ M! W% Z. |2 h- X& t7 a
, y0 i: n6 `" g
国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛？谢谢！
0 L% M, \% G0 |现在光养一养，已经不行了吧，分子调控，表观调控才是王道。

ellapan

回复 3# ppcl2 6 {# h. V& r' a. d' t

) D* J& o+ U1 k# N& E; b0 n   呵呵 我就是做小鼠PGC的，过去的一年一直做表观遗传之类的，现在实验基本开始收尾，目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导  l7 W% L, d, Y1 }$ u
  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人，还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人5 K( D! H8 T  `  }0 Q
你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法

ppcl2

" h# g, N. j: @1 W3 C2 J

0 @' i  q1 @" s  p哈哈，你说的这些人一个也没听说过，当然不是说他们不牛，俺不做PGC已经n年了，现在只是偶尔看一下，关注一下进展，但对目前的状况并没有一个整体的把握。9 G% {) @7 m) N  }9 B$ X
我说表观遗传重要，但并不是说他最重要，因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果，但频繁的变化肯定是有其重要作用，这是已知的事实。7 A$ k" v( Y' E& j
能从ES分化出PGC来，这个更是很多人已经实践过的事情，科研需要一种脚踏实地的奉献精神，还要有开拓精神，现在基本的东西还远没搞清楚，盲目去搞应用，肯定是会失败而终，当然基础是为将来的应用打基础的，PGC的研究远比ES要早，100多年了，结果现在比研究了30来年的ES要落后许多，如和形成，如何迁移，如何扩增，如何风化每一步都有很多事情需要去做，特别是in vivo的东西。Anne McLaren，Brigid Hogan，Azim Surani，Wolf Reik， Ruth Lehmann，Haifan Lin, Chris Wylie，Mitinori Saitou，Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西，特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。

ppcl2

看了一下你说的那几个人，国内做生殖细胞，以后估计是王海滨的天下，其他人跟他比顶多算灌水专家。

ellapan

回复 6# ppcl2
5 k* |* w* Z' c0 B; C8 e
2 a3 _  W& |+ j2 l% d: {
6 g( Y" A5 K4 ~' e$ |% _) A    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨？他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀

ppcl2

恩，就是夏国良门下的那个王海滨，胖小子虽然还是新人，但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了，这老夏自己也承认的，其他几个就目前的业绩就比不过他了，他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的，独立后自己也已经发过高水平论文，现在有安民照着，以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人，要全职回去的话，水平十分了得。

chenkang91

您好，学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方，现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法？

细胞海洋

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