脐带间充质干细胞原代培养问题

blackhei

组织块贴壁法培养脐带间充质干细胞，换液的时候会把一些小的组织块吸掉，这会不会有影响呢？另外贴壁法培养干细胞的原理是什么？

zxb1105453899

我们之前都是在有细胞爬出来的时候（一般在第5天或6天）在进行换液，那时候如果组织已经脱落了吸掉也没关系，另外最好用专用的塑料吸管吸，这样不容易把其他组织弄脱落

blackhei

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这样的话是不是爬出的细胞就少了呢？如果就是吸掉也没有关系的话，说明贴壁的原理是什么呢？希望得到您的解答

2357710447

间充质细胞就是贴壁生长的  这就是原理   你用悬浮法是不能长出细胞的
1 T0 K2 U9 m8 Y1 Z移液管吸掉一些不贴壁的较小的组织块也没关系   他不贴壁也不会跑出细胞    不用纠结     注意原代培养的时候组织块不要剪得太碎就可以了

blackhei

回复 2357710447 的帖子9 F6 T! m" b- T; B4 N; Y
* D$ e% f) d1 B
那贴壁的话是不是靠的是一些细胞因子呢？

黎黎何

有些细胞会长在组织周围，但不会产生太大的影响

2357710447

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  W5 Q3 F- L  k- G1 U5 Z
4 c' k0 z; U8 i& v细胞会分泌细胞外基质，这种细胞外基质黏附在支持物的表面（如培养瓶、培养皿的底面）。
  ~- V4 l  N, n( v" u& L细胞通过其表面的黏附因子与这些细胞外基质结合。所以细胞贴壁与否与细胞本身分泌细胞外基质的能力以及细胞本身表达的黏附分子的数量有关，也与培养皿瓶的表面结构有关。) w5 `2 d: k* W1 R
培养基中的黏附蛋白也会掺入到细胞外基质中。

blackhei

回复 2357710447 的帖子8 D& n$ }) @, `: q" |/ [

, Z+ |0 R! c; c谢谢，非常感谢

随时准备下线

贴壁法培养干细胞，我是这样做的。脐带选择华通胶，剪到合适大小后，贴壁6小时，刚开始细胞不会爬出来，所以可以放少量的培养基，只要能浸润到组织块就可以了。还有换液不要太勤快，我觉得完全没必要。

1梅梅加油

不会有影响，换液换掉的组织块比较小，如果有细胞爬出也是在它周围，不会把细胞换掉，细胞会继续增殖。