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[请教] 关于细胞代次的疑惑 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-9-1 09:43 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在考虑一个问题,如果同样是一皿细胞,采用两种不同的传代方法,第一种是一传四,到P1(4皿),第二种先一传二,到P1(2皿),再一传二,到P2(4皿)。请问这个P1(4皿)与P2(4皿)有什么差异?这个还只是传代次数较少,较多的时候呢?比如P4(256皿)与P8(256皿)?细胞代次的意义是否在于考虑细胞处理对于细胞的影响呢?

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沙发
发表于 2017-9-1 10:06 |只看该作者
好问题,同问

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藤椅
发表于 2017-9-1 13:20 |只看该作者
一起来学习探讨一下,首先传代代次和细胞的世代(倍增代数)并不是同一个概念,我们说的第4代细胞,只是指这个细胞已经传代了4次;而一般正常传一次代,细胞基本能倍增3-5倍,所以这个第四代细胞按照细胞世代来说可能已经是10几代了。所以现在很多地方都用细胞的倍增代数来表示细胞的代次了,并不是用传代次数。然后细胞经过一次传代后,会经过三个时期,潜伏期,对数生长期,平台期,当细胞处于平台期时就需要进行传代培养,不然细胞就会中毒,形态改变,甚至死亡。
6 h' K; T" _( t说回你上面的问题,你用两种方法进行传代(假定你的第一种方法传代时细胞量是第二种的两倍,传代后种瓶的密度相同)第一种一传四,那时候细胞可能已经进入平台期,在你传代之前也许已经有细胞的形态发生改变,或老化或分化;而第二种一传二,细胞肯定还在对数生长期,这时候传代能够保证细胞形态不会发生改变,但是要注意,第二种方法需要传两次代才能到4皿,使用两次胰酶对于细胞的损害也是很大的。所以如果你想得到更多更好的细胞,只有不停研究实验你的细胞在倍增数为多少的时候传代是最合理的。当然如果你想做的是培养基对于细胞的连续传代实验的话,肯定是要在细胞扩增一倍的时候传代的。7 ~' J* A" s$ D. t  m) N
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板凳
发表于 2017-9-1 16:58 |只看该作者
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3 Y( U9 K) F6 ?1 @( z$ K0 G
0 T  }, a; n7 d# X2 B* I首先谢谢你的回答。细胞倍增代数该如何计算呢?以这个问题为例,假设不同传代方式细胞都能良好增殖,细胞通过两种传代方式从一个皿增殖到4个皿,都是倍增2代是吗?也就是说从倍增代数这个意义来说,它们是处于同一阶段的细胞,差别就在于细胞处理带来的影响了?
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