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[请教] 我的细胞哪里去了   [复制链接]

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楼主
发表于 2017-8-23 18:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
间充质干细胞培养,融合率达到70%后,消化传代。消化离心后,细胞不见了,细胞计数为0。但是在传代后半小时又逐渐有细胞出现的培养瓶中,这是怎么回事?

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沙发
发表于 2017-8-23 21:34 |只看该作者
本帖最后由 快来快来数一数 于 2017-8-23 21:35 编辑 % G' w. O# t! t# _" g4 g! ?
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回复 免疫与细胞 的帖子$ S- \5 ~: O+ t+ I7 T
% q& h$ u2 C( k' X6 ]% s2 N
离心后要吸出废液,加入培养基吹散使再悬浮,然后计数。你看看是不是忘了吹打了。另外如果密度低,是有可能在计数板的小格看不着细胞的,所以稀释倍数别太大。

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藤椅
发表于 2017-8-23 21:35 |只看该作者
太过稀释了吧?或者是计数仪参数没设定好?

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板凳
发表于 2017-8-24 07:59 |只看该作者
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按多大的比例传代?1:?传的?有可能是传代太稀了9 K$ j/ e* E, R8 h5 y) l  B

( g; P! Z6 p% \

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报纸
发表于 2017-8-24 08:34 |只看该作者
传的太稀了,容易长不起来,对细胞活力也有影响!

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地板
发表于 2017-8-24 09:01 |只看该作者
回复 理科小文艺 的帖子% l) B3 ]7 T$ _$ r

! z' M- D; Q2 r! Q8 O9 p# e+ c我还没传代呢,就是消化之后离心收集细胞,重悬进行细胞计数的时候,细胞没了,一会又出来了。

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发表于 2017-8-24 09:13 |只看该作者
你这个问题描述的像悬疑片一样,细胞不见了又出来了,别人回答只能凭空想象。细胞再少计数时总能看到一两个吧,你这个操作是同以前一样,只是这次出现异常?计数是计数仪还是计数板

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发表于 2017-8-24 11:03 |只看该作者
重点检查计数设备有没有问题。

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发表于 2017-8-24 13:13 |只看该作者
回复 免疫与细胞 的帖子) {" y/ I1 D( F- ?3 H

* T' x3 j( i4 g2 m: o2 u8 a* F8 I. tok,那你是如何判断你的细胞又出现了呢?你确定自己前后取的样是一个出处?找找自己操作环节的问题吧。
+ n7 A$ E2 D0 _6 M! L2 E

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发表于 2017-8-24 13:23 |只看该作者
回复 理科小文艺 的帖子, j+ s7 d" D2 C+ s
4 Z7 {( g  c4 B! K+ y
是这样,我在消化后收集细胞,细胞计数,血球分析仪计数为0,手动计数也没有看到细胞。因此就没有按照细胞数来接种,直接接种到2个培养瓶,显微镜下可以看到培养瓶中悬浮细胞。也有可能是细胞量太少,但是我消化的时候细胞很多,因此很困惑。
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