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请教DC细胞培养问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2017-8-11 15:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近培养的DC细胞在贴壁培养24小时后出现大量黑色渣滓,贴壁的DC细胞也几乎全部飘起,2天后DC细胞全部死亡,有没有高手帮我分析分析原因。DC细胞贴壁时间1.5h,加GM1000U/ml、IL4 400U/ml、自体血清5%(56度灭活),这个体系之前做过很多份样本,只是最近遇到这种问题。

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沙发
发表于 2017-8-11 16:11 |只看该作者
附上拍摄的照片
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藤椅
发表于 2017-8-11 16:43 |只看该作者
我说就不要加自体血清了,换成Xvivo-15,GM和IL-4都加到500IU/ml就ok,贴壁时间可以适当延长,过夜也可以的~试试看$ |( U# ~2 c! K! r2 i% d
如果之前重复多次没问题,很可能是这一份样本质量不好

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板凳
发表于 2017-8-11 17:48 |只看该作者
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回复 baby00000003 的帖子, t8 y8 D8 D* ?
% _8 \5 R: J1 A5 X1 B
请问Xvivo-15是什么东西?谢谢

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报纸
发表于 2017-8-11 17:49 |只看该作者
回复 1538238029 的帖子
; M+ Y+ Q5 L1 N) v, d9 Y4 Z; [: c4 u, D
, L; f5 E1 p' C1 k" }4 w0 e6 Y, x有没有可能是移液管外侧掉下的喷漆,就是刻度那个?

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包包
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地板
发表于 2017-8-14 14:43 |只看该作者
回复 anzhida0823 的帖子6 p& }5 v- q( @8 U7 ]

/ k8 o( n$ m: Y  p7 ]! A培养基

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发表于 2017-8-14 15:10 |只看该作者
回复 剡溪兰客 的帖子
- l3 M( @$ q% P8 b0 j# v( F' v$ N6 a# Q
恩,谢谢!

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发表于 2017-8-16 11:27 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子6 A9 t% c8 D: |9 o& |; p

& [) a9 i# H2 x/ y4 P自体血清真的很脏,后面一份样本单独培养了一下血清,瓶底都是渣

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发表于 2017-8-16 11:29 |只看该作者
回复 anzhida0823 的帖子
! j1 A2 X0 \. G. F1 B  c$ L2 r, B# w+ r0 t9 W$ f0 z
不是喷漆,镜下观察是类似于细胞凋亡形成的残骸,而且喷漆不可能掉这么多的

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发表于 2017-9-18 16:47 |只看该作者
这样看很像污染吧,对了,你是分离的什么来源的DC呀,为什么要加自提来源的血清,我们就加的GIBCO的High-Inactivty的血清咧
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