成体NSCs原代消化酶的问题

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- @2 [+ o* J# k. d' N: j. t4 `0 P我现在养成体NSCs，如图所示，取3月龄大鼠的SVZ和DG取脑组织（可能范围略宽一点），剪碎成约1mm3大小组织块，- ^0 e) O* }, C# O- X* y. _
用3ml Hank’s液+2.5mg/ml胰酶（gibico）+15mg/ml 木瓜酶（solabio）+2.5mg/ml 2型胶原酶（merk）+0.2mg/ml Dnase（solabio）+0.02%EDTA，: \) X+ B9 S. u( H% ?6 U
37℃消化 30min，发现组织块消化效果很差，基本上看不出组织块有减少的迹象，经过吹打后，依然有大量组织块，消化得到的细胞也很少。
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9 N* L) U( F7 h' t2 C% w+ w+ C. l$ ~我这个酶浓度是反复试验、不断加量到这个剂量的，已经比文献超出了许多倍，但每次都无法取得良好的消化效果。
3 w1 c2 A1 \2 i% L: B以前养神经元，取新生鼠皮层，1.25mg/ml的胰酶，15分钟，组织块很快就彻底消化干净了，怎么成年鼠的脑组织这么难消化？
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, Y7 q, |" |% K6 d, y1 u+ e1 ?" ]! a请教各位老师，有没有养成体NSCs的经验可以指教的？谢谢。
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消化酶都是现配现用，质量应该不存在问题，胰酶每次拿来传代效果都很好。。胶原酶和木瓜酶都是新买的。