求教，关于部分NK细胞贴壁的状况

shy-shen

PBMC中提取培养的NK细胞理论上是悬浮培养的，为什么长到14天后，存在许多的贴壁细胞；这些贴壁细胞经检测也是NK细胞。是否可以用冰袋将这些贴壁细胞悬浮起来。会对细胞有损伤吗

gondobar

不需要冰袋，加入4℃培养基或者PBS吹打就可以下来。

shy-shen

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4 i; T9 f! p: a8 s! A您好！  那些贴壁细胞是什么细胞呢？

gondobar

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3 T& f# f- ~7 z2 _/ r# V
$ T$ T$ i: j& w/ t4 G% g: F做过流式 其实贴壁的很多都是NK（当然这也和你加入的培养体系有关），甚至贴壁的比悬浮的流式好很多，所以尽量吹打下来这部分细胞。悬浮细胞并不是完全不贴壁的，NK、CIK在培养中也会部分贴壁，如果贴壁严重你可以换培养瓶，常规的瓶子都是处理过的，细胞本身容易贴。

shy-shen

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$ i/ J3 w; X; F6 s. S& A# @9 g1 ?
' D& ^0 a/ q. s& e% S好的  谢谢

地球外世界

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5 P1 R8 l1 P* K- d) t
1 l) _7 @. k' g: y采用未经表面处理的瓶子培养，起初有贴壁，后面会渐渐飘起来。为什么培养14d的细胞反而会聚团贴壁生长呢？

地球外世界

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$ F4 e# R5 @& [+ r+ [4 [5 y& n7 E/ u& u+ U1 H' O
检测NK的指标是哪个？是CD3-CD16+CD56+，还是只看CD16+CD56+？想问问是怎么检测的（想问流式同型和抗体的使用）？

shy-shen

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  m2 H; T8 U4 J# O8 G# r$ ]/ W$ m+ _8 j; u3 l  ~8 ~+ g
大部分的检测指标是CD3-CD56+,有3种亚群的分类方式，一种是根据表面标志分为CD56bright
9 @6 k" L- g/ v9 f  \h和CD56dim 检测指标分别是CD3-CD56+CD16-和CD3-CD56-CD16+，根据分泌因子区分处于研究阶段，根据粘附功能分为ANK和NANK，检测指标分别是CD3-CD56dimCD16+和CD56dim、CD16+、CD56-、CD16-

地球外世界

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( \* x0 L( i$ C" x这些每个检测的结果是百分比相加后算总和吗？

shy-shen

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你通过流式检测，只要看双染的百分比就好了， 如果你想要知道细致的亚群的话就看三染的百分比