诱导iPS过程中，哪些因素会影响成功率，需要注意哪些事项？

wangjintao

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各位大神，有谁知道诱导iPS过程中，哪些因素会影响成功率，需要注意哪些事项？

niliu730323143

首先是细胞状态，收集的细胞不能太老。电转的话质粒和细胞的比例要摸索最佳的比例，慢病毒感染的话就要摸索最佳感染复数。然后，就是更换培养基的时机了。仅仅了解，权当聊天。:handshake

scottist

我做过用慢病毒将MEF诱导为iPS细胞。个人认为：1 MEF的状态要好，镜下观察立体感强，遮光性好；2 慢性毒的滴度要高，滴度低了没有效果，建议用四因子串联的质粒，滴度不够的话可以用100kd蛋白纯化柱进行浓缩，慢病毒新鲜使用，尽量不要经过冻融。3 细胞初始密度不要太高，细胞生长太快到接触抑制会影响iPS的产生率。4 病毒感染后2天左右即可换成iPS完全培养基。 5 一定要注意细胞长满后，会发生整个片层的脱落，解决方法我也不清楚，之前发生过类似情况，眼看着iPS克隆还没到挑的时候就随着整个片层缩成一团，欲哭无泪啊。
3 [: v0 f6 n7 \- ~' E, [祝成功！