求推荐神经干细胞培养基或者因子

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求推荐一种神经干细胞培养基，目前实验室用的培养基细胞长势一般，细胞酶解后离心洗涤，用培养基重悬会出现絮状物质，拿枪头吹也吹不散，三天后培养基中会出现絮状物质，絮状物之中有大量神经干细胞球，目前想换一种培养基对照一下，酶解的酶目前是用的TryplE

深海寂寞鱼

1125476931 发表于 2017-1-16 14:47
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. h/ B3 z# e/ h, T& L! ]) j" n; B( F1 H请问你使用胰酶进行细胞消化的吗？0 @1 x/ Q. C) ~! L4 J& C  {

7 B0 Z5 ]$ `+ ]3 O就你描述的情况来看，感觉像是消化的稍微有些过，导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个：9 J- }4 e+ [: X( e  [3 i" Z
1. 如果科研经费不成经费，建议考虑换成Accutase进行细胞消化。  h+ A3 g3 r" R' e/ T7 x" p

: ~& Q0 K- u0 U2 p5 L5 V. p2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶（具体浓度我忘记了，你可以查一下资料），这样可以消除絮状物l了。
5 h6 _  d2 u1 J5 e1 L    还有如果是用胰酶消化的话，消化时间不宜太长，消化后吹打不要力量太大。$ ]( q5 p; I2 s. y, s

8 X8 Y! f# J( s, [. \此外，神经干细胞不是非要通过酶消化法传代，机械吹打也可以用来进行传代，只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要，来选择传代方式。. D+ O# r5 Z. r

& |2 S; ~; D+ w# P有问题多多交流。

wm阿咪

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我用的accutase。不过也会有絮状物。机械吹打把握不好力度，每次消化后单个细胞总是长不大了，然后就分化了。

wm阿咪

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用STEM PRO ACCUTASE对细胞伤害会小一些。