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楼主: fm001982
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[请教] 细胞复苏解冻问题   [复制链接]

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发表于 2016-11-10 11:20 |只看该作者
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2 o9 i4 E- C. p: o, C
, L" k9 k" R6 u4 s& d# M的确很冰,我记得当时培训的老师交大家,就是用双手戳几下,然后放入水浴锅中,摇晃起来
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发表于 2016-11-10 11:32 |只看该作者
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6 E" y  J1 j# I. Z; p1 q# T# H! f+ W% \
你的量有些大,不过多用些力量晃还是能够加速溶解的,至于能不能到1min就溶解了,还要你试试
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发表于 2016-11-10 12:26 |只看该作者
再次对大家的建议和帮助表示衷心感谢,虽然是小问题,但我会用心记下,并传播给更多的人~

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发表于 2016-11-10 16:14 |只看该作者
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温度调高,40-42度应该都没问题,使劲晃,看到还有一点小冰粒就拿出来。建议冻存时500ul冻存足矣。
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发表于 2016-11-14 10:53 |只看该作者
冻存体积小一点,一般1ml,复苏温度42度
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发表于 2016-11-14 20:24 |只看该作者
复苏时注意的问题1、提前最好各项准备,如将细胞洗涤液预温后,加在刻度离心管内,放在超净台内;2、解冻时水温39-40度,水量要大一些,1个冻存管可用200-300ml的水;3、待冻存管内细胞液部分已解冻,用毛细滴管吸入预先准备好的细胞洗涤液中吹吸几次使全部解冻,4、整个操作控制在1min内。这样可最大限度的保存细胞活性。
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发表于 2016-11-18 14:43 |只看该作者
摇晃冻存管,加速溶解,还就是并不是一定要全融,可以融到剩一点小冰晶
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发表于 2016-11-18 16:51 |只看该作者
我们冻存的量也会在1-1.5ml,一般是42度解冻,在水里多晃动一下,当解冻至剩下一小粒冰块时,拿出来,用酒精消毒后开始操作,这时冰块已经融了。解冻的时间2分钟以内,解冻后细胞活率也比较高
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发表于 2016-12-14 14:54 |只看该作者
我们每管冻存1.5ml,复苏时基本也要2分钟。
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发表于 2016-12-15 11:08 |只看该作者
解冻的时候要快速晃动冻存管,解冻还是很快的,另外建议冻存时减少每管冻存液体积,可适当增加冻存密度
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