脐带间充质细胞形态的问题

gm3771052

最近养了一批脐带间充质细胞，从一代到三代细胞的形态还比较稳定，至少是梭形，虽然有些个体比较大。
: I$ ?7 Y( u! n% v但是等我传到第四代的时候细胞个体居然变了，成了不规则的圆形，椭圆形。而且细胞周围边缘也比较模糊
4 b& R& h( K# w- b# g  Z) c+ {5 ^1 H想问下有没有其他朋友也遇到过类似的问题，是什么情况导致的。
; ?% h9 o) ^; ~1 r( f5 v% ]你们是怎么解决处理的，有没有什么好的方法 ！谢谢！
1 v  ^7 A" q' p2 B& I# R  ^

yingfeixiang

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* e9 R$ i" k) ~
从你的描述可以看出来，这个细胞生长的状态不是特别好，前三代就有这个现象，之后加重了，这个一般是个体原因吧，没有什么好的解决办法

修行

1：自分化了。发生自分化后没有解决办法。: |# [( B. w8 Y4 f- \: y/ _  |* q
2：建议排查自己培养中所用培养基和因子，寻找原因。

cuijiaoyan

跟你的接种密度也有关系吧，密度太小容易老化和分化。

sunny2829

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) ~  l9 T2 o& B$ H1 z! T+ R+ T2 A; y, i; ^& A* X; J
P1-P3应该是短梭形，个体比较小。个体比较大，就有可能是分化或者老化了。. G/ I. l, O: x/ t: c$ c1 `8 {6 L
P4成了圆形，就应该是老化了。5 _7 r. A) H% }) N' Y0 `. n
你应该先确定培养基是不是脐带干培养基，因子添加有无问题。
+ ^) o/ B0 |! l5 g. Y, Q若没问题就是实验操作的原因导致细胞老化，如脐带运输冷藏时间过长，原代操作时间过长，组织块干燥，细胞密度太稀或者太密，酶消化时间过长等等，都有可能导致细胞老化。
3 Y5 Q7 U+ L) j7 i' `1 G个人经验。

gm3771052

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+ y/ o% b0 O/ }) X; {培养基无血清的 ，有没有推荐？

sunny2829

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5 Z6 w' A# ]* g, L3 r: C
. t$ j. _1 o5 B% V3 n2 cGIBCO的，文献较多。
0 W+ h' z" D  vLONZA的也不错。资金充足的话可以买来试一试。

kiss2346

应该是培养基不是很适用

15122224893

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3 Y# {4 }& C2 s2 l3 ]
, m$ l* q9 `8 s* r; w7 A很近