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楼主: swtarron
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脂肪间充质细胞消化、收集的问题   [复制链接]

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发表于 2016-9-14 14:40 |只看该作者
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) K2 }- B& W; ]& a9 l0 h6 e* o! x% w$ t8 k8 m6 r) v( D$ d& a0 B5 L
亲,培养基应该不一样,用血清培养基培养的脂肪干细胞肯定比无血清培养基培养的要大一些。不过我才开始养人的脂肪间充质干细胞,数据还不可靠。
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发表于 2016-9-14 15:13 |只看该作者
回复 田甜 的帖子5 {$ S! t3 a( D' t# s3 T" `

) Z4 M; g8 L7 T0 J# E! ]7 u; y1 P我们用的也是无血清的培养基
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发表于 2016-9-14 19:33 |只看该作者
长得好的话T175瓶1*107
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发表于 2016-9-19 13:48 |只看该作者
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回复 swtarron 的帖子; |. w, z4 i6 i9 {; \! M4 p7 H

; K9 I  C/ r+ u' m如果6-8分钟还不能消化下来,就表明细胞不纯。建议消化1-2分钟之后就终止消化,消化下来的继续培养,原瓶里的细胞可以不要了。通过这个步骤可以纯化,T75长满了每瓶大概有200万细胞吧
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发表于 2016-9-21 08:30 |只看该作者
TrypLE消化就行啊,没有包被的2分钟就能消化下来。。。。
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发表于 2016-9-22 17:00 |只看该作者
我们培养脂肪间充质干细胞用的是150mm的细胞培养皿,每次传代后大概72小时就能长满,而且我们用的EDTA胰蛋白酶买来的原液是0.25%的,直接用的话细胞会被很快的消化掉,我们都是经过稀释之后才用的,消化起来也很快的,用的是无血清培养基,专门买的,挺好用的
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发表于 2016-10-21 13:27 |只看该作者
一般0.125胰酶+edta 都是很好消化的。1个T175 收获 8*10e6 左右的细胞
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发表于 2016-11-15 16:40 |只看该作者
新鲜的胰酶,提前预热,培养箱消化,对了洗液也最好预热一下,一般不会太慢
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发表于 2016-11-25 16:01 |只看该作者
这很简单啊 因为你养的不是脂肪干细胞 里面混有大量的成纤维细胞,就是不好消化的,为了纯化脂肪干细胞,都是用胰蛋白酶消化法去除成纤维细胞的。一般3分钟以内不超过5分钟
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发表于 2016-11-30 11:29 |只看该作者
问一下不同来源的间充质干细胞分化潜能上有差异吗?以及临床上使用病种有限制吗
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