分离血液单核细胞离心后上层（血浆层）浑浊原因讨论

henryjia

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1 a6 ?' _, p: m" \6 k如图所见：
$ u& D/ n% f. Q/ Y' k8 n- _, E小猪血液1：1 PBS稀释后密度梯度离心。离心后上层（血浆层）浑浊， 没有清晰的单核细胞层。同样方法以往多次使用只有一次出现类似状况。请教是什么原因造成的，提前谢过！

随时准备下线

7 g6 U2 v9 U8 D+ p# a# X& s) ^0 _5 Q/ n' e" ?+ ?
1、我遇到过上层浑浊，老师说是含脂类物质过多，具体原因我也不清楚。但是单核细胞层都是有的，只是分层不清楚，略微偏下。
0 g* k1 G# h6 D$ f2、你的离心时间和转速可能需要加大些。仔细看，你的单核细胞层应该是有太多红细胞没完全富集到管低，细胞分离液层都不清楚，仍然有不少红细胞。
9 B- |5 M2 P/ d4 p3、想问下你的血是放在4度的？或者淋巴细胞分离液放的4度？我觉得应该在室温下进行分离，试剂等得恢复室温，温度影响淋巴细胞分离液的密度。
! e8 z/ N, [- x     实在不行就换一个吧！这一般都是个例现象。

chimo100

1、这个和分离液品牌也有一定的关系，一般GE的和CORNING的分的都还可以；
* b0 D3 W) O. j' _* Y; x2、如果用50ml离心管分离效果不好的话，可以用15ml的管子；2 D( e) u: B8 P& q( ?
3、分离液与血要1:1加，分离液加的少也不容易分开。

lyj-0017

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1 c( Z7 Y0 i* i, T( o, Y" p8 S- F
) u1 H/ e/ g8 }( F! |你这个是乳糜血或者患者在采血之前输注过脂肪乳吧？这样的话只能在分离前加倍稀释血液，吸取白膜时尽量在界面那个位置，能吸多少算多少

panda2333

应该是血液中含脂过高导致的·····

henryjia

多谢各位指点!