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脂肪干细胞传代就死亡为何? [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2016-5-12 17:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
给位同学:
  m" n8 S, F) f; w' t* i2 {& ~2 H# x
最近养的脂肪干,总是过不了P3代就死了。我是用胶原酶+胰蛋白酶消化得来,然后正常培养和传代。现象是,P0代生长良好,传代略差,到P2代或有时候P3代就出现老化坏死,然后过一夜会死坏死很多。
0 h$ |- N" A, j" y用的培养基是Hycone的αMEM+10%FBS(BI牌子的血清)。问GIBCO的技术支持,说是血清影响最大,可是GIBCO血清这么贵怎么玩的起?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2016-5-13 08:52 |只看该作者
亲,检查一下你干细胞分离的纯度
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藤椅
发表于 2016-5-13 09:07 |只看该作者
个人意见,仅供参考:血清的量太高可能会加速干细胞的老化,可以适当减少血清在培养基中的占比,另外有血清参与的培养,已不能称之为“干”细胞,充其量称之为“多能细胞”。还有就是BI的血清我们也在用,效果也不错,也不怎么便宜2000+/瓶,
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板凳
发表于 2016-5-13 09:41 |只看该作者
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是不是原代消化时间太长了,不知道你的消化条件和时间怎样?我们有试过胶原酶或者胰酶的,没试过两个一起
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报纸
发表于 2016-5-13 11:02 |只看该作者
用普通的胰酶就可以了,消化半分钟就应该能把大部分细胞消化下来了
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地板
发表于 2016-7-27 12:49 |只看该作者
只单独使用过胰蛋白酶。
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