终止胰酶消化的培养基量的定位

anning111

实话告诉你吧，真正能中止胰酶消作用的是FBS，而不是基础培养基。) W. j0 U5 p( R# @* O
* _* J$ c: u5 O; o7 C; P6 I
如果是Tryple,只能采取稀释的方式才能终止消化。

风倾颜

我们实验室一般情况下是1:1的加，不过我觉得还是多加一点的好，防止过消化

abc2613130

原则上都是等量添加，但是，我们操作的时候就基本上都是两倍量

bubble_w

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1 k6 @6 f: e! p" A终止胰酶消化的量是一定要大于胰酶使用的量。有人使用品牌生产的胰酶抑制剂作为终止消化液，我们实验室一般使用培养液作为终止消化液。至于终止消化的液体量要看实验室的经济情况，我们一般采取至少两倍消化液的体积的量去终止消化，这样做的好处是终止消化比较彻底，加入的液体量大对消化为悬浮状态的细胞有保护和缓冲的作用。当然，如果你们实验室经费充足，建议3-4倍胰酶量的培养液终止消化，这样对大量贴壁细胞的彻底消化也是有好处的。

sfnana

一般我们要求是等比例中止消化，但是在实际的操作过程中，我们一般都会多加一些培养液来中止消化，原因如下：$ s" x5 L* A3 R$ c6 g
1.血清可以更充分的与酶结合，彻底中止酶的消化作用。在操作的时候，因为一般都是多瓶操作，所以后面几瓶等待的时间可能会较长，如果按照1:1中止消化，有可能中止不彻底，胰酶继续作用，毕竟胰酶对细胞的伤害比较大，所以可能导致同批次的细胞有的传代后细胞状态好，有的不好。
1 U8 y6 C* R8 K. W2.对于贴壁细胞来说需要吹打，如果液体体积太小，吹打过程中容易产生大量的气泡，这些气泡的产生对细胞的伤害也比较大。