终止胰酶消化的培养基量的定位

野猪

如果终止消化后，离心去掉上清，再培养的话，终止酶解不需要太多培养基，大于酶解液就可以。3 t! X; M2 M# M2 Y# N
在刚培养细胞的时候，因为听说，酶解后终止加入等量培养基不需要离心，直接用完全培养基直接稀释至需要传代的体积然后培养。
/ V: P' s; N- h) s$ @自己尝试了一下，结果，过了周末回来，细胞都不见了。。。。。: T+ O: c0 D% W) L: a+ [
所以我觉得完全培养基可以削弱胰酶的活力，但终止真算不上，还是尽量加多点比较好。

Diane0321

一般我们都会在1：1的基础上再加一些，这样可以更好的维持细胞的状态

yeshch

为了降低对细胞的损伤，我们经常把胰酶稀释两倍，这样终止时加含血清的medium 1:1终止就好；如果胰酶原液消化的话，建议多加一点培养基终止，尤其是培养基中血清浓度不高时

cellcellcell

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当时我们在培养肿瘤细胞或者正常细胞的时候，用于消化的胰酶与培养基的比例是1:3，即一瓶25cm规格的细胞用1ml的胰酶（0.25%）消化，消化完后用3ml的全培终止消化。
1 J: m" l% f$ ~4 r如果想知道具体的操作，首先要搞清楚为什么要用全培来终止消化？因为全培中含有某种抑制胰酶作用的成分，所以要用全培来消化。而且胰酶消化时，要先将胰酶放在37℃水浴中预热，然后再加入培养瓶中，这样使胰酶的活性最强，消化作用最好。

田甜

T75为例：1ml0.25%-0.02的胰酶-EDTA，消化观察细胞变圆，消化充分（但细胞还未脱落），弃取胰酶，加4ml血清培养基（可以是新鲜培养基，也可以是之前培养的上清）。一直这么操作，效果不错。

Diane0321

原则上来讲按1：1加培养基，但是很多时候多加一些会更好一点，以确保完全终止消化，对于MSC，我一把都是加等量的培养基终止消化，而且消化时间短一些，因为它很容易就消化下来了，所以一定要把握好终止消化的时间，以免消化过度

veda327

第一：如果是需要进行临床试验的MSC，体系内最好不要混入动物源性的血清，所以准备这个一枚的终止液需要慎重。9 o% v6 y$ d' r" L! _, T
第二：不知道大家都是怎么操作的，难道是胰酶消化之后就直接在消化液中添加终止液么？我一般都是加入一定量的胰酶消化液消化一段时间后去除消化液，让残留的消化液继续消化几分钟，见到细胞开始（成片）脱落之后加入生长培养基，这样子就不需要考虑什么终止液的用量了，体系内实际残留的胰酶的量非常少了！

蚂蚁上树

是血清成分终止了胰酶的作用，所以，个人认为不应该只看终止培养基的体积，而是培养基中的血清的含量，血清浓度大的可以稍加一点即可

枫之叶影

无血清培养基培养的细胞消化，应该是降低胰酶浓度，从而是胰酶的消化能力减弱或者消失，这样看至少是1:1的终止液终止消化

hitmanc

用之前培养液上清，添加量至少比胰酶多