造血干细胞流式检测结果分析

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回复 nailute1985 的帖子3 ]& N) W$ w- L  n( n. O

. `+ o# s# L5 z% B) @( m大部分门的设置没有太大的问题，有两处有疑惑，第一个在调补偿的时候，同型对照也就是阴性对照的管的划门位置（R1）怎么划合适。第二个是调整后的R4的调整位置在哪里？

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6 C2 r# p1 @3 J9 k" r, U) D2 N: _0 S. Z
我们此次是检测CD34+CD45+CD133，所以我们按三色的检测标准。
, T8 x! c0 A' S- I1 E! ]3 Z1.FITC+PerCP+APC的三个同型对照抗体加细胞' ~$ {9 }' t6 M
2.FITC+PerCP+APC的补偿管，共3管0 Z! u1 E) s+ Z: I( q: [
3.待测管+FITC+PerCP+APC三种抗体/ J; M: e% q' i/ w9 R1 [
共5管

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回复 nailute1985 的帖子8 W& \, |1 Q: N/ `

2 u0 [# H) i3 q; s& ]不是吧。调补偿有专门的补偿管。阴性对照跟调补偿毫无关系好吧。一般以前我们是光细胞做阴对只是考虑了细胞的自发荧光，没有考虑细胞与抗体Fc段结婚，所以用同型对照来排除非特异性的干扰。

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. H/ k) s- A: W/ p. X2 K5 P9 y7 t2 p- T5 j. k; B, ]8 p
这个我明白，我们都是调好的，然后检测待测管，这个没有疑问。但我们的第一管是加了细胞和三种同型对照抗体，这个是作为阴性对照来使用的。用待测管的值减去同型对照的值得到最终的结果.

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9 y( y# Y- R1 Q( Q
- y0 A# X7 L! s% k4 \/ b. l, T我们根据您的说话，又重新分析了，发现结果高了差不多一倍。说明样品还是存在问题。我们的造血干细胞的样本里面含采集液，成分很复杂，估计有不少类似碎片东西。下次实验我们想标记前洗涤几次之后再标记，也许拖尾不会那么严重。