分离单核细胞时，如何吸取白膜层？

wanglinling

是用50ml离心管梯度的吗？白膜层应该是比较明显的，可以用1ml枪头触及分离液与上层交接处的白膜层直接吸，一般7ml左右可以完全吸干净。如果没有明显的白膜层考虑1，单核细胞数量偏少。2，梯度的时候操作不当导致分界层模糊。3，降速太快扰乱了本来界限清楚的白膜层。

wanglinling

如果是上面的某种原因导致的可以改善的方法：1，梯度液应在室温18-25°使用。2，铺梯度的时候尽量放液慢，可以倾斜离心管。3，离心结束的降速调低。

wanglinling

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" i3 d( g, V2 S- E. n; o
那你应该观察一下刚铺好梯度的时候分层是否明显，可以看出你铺的好不好

wanglinling

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' S2 Q3 n9 T: Z9 e6 P; p
+ h& a& \7 n7 K6 s0 j8 x) Y去血浆是什么意思？怎么去的哦？

wanglinling

回复 lxy07 的帖子# H1 y  I$ G: M0 t6 i: k: g

; N6 U* ^2 O+ l! Y5 V8 R6 Y你是白膜层一点都看不到还是只是细胞少而已

wanglinling

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% Z2 m) X: n" J) t4 b
* c9 d5 ~) |' X9 j那还是梯度没有弄好，换一种分离液试试吧，不知道你们用的哪种？