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楼主: lxy07
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分离单核细胞时,如何吸取白膜层?   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-3-11 08:50 |显示全部帖子
1、先检查一下你们的FICOLL是否为MNC专用,其密度是否符合标准,为1.077±0.001。
3 Q. @) K! i2 l# T; ?+ L' l( R' Z& {2、全血加FICOLL之前要去血浆,稀释的。6 c" \8 s. U/ N3 r- q( F: H6 ]! A
3、加FICOLL时要小心仔细,使FICOLL和血细胞有明显分层。
5 k( b) U& U7 W# u* ^4、FICOLL离心时,升降速都要调低,一般为升6降4就可以。, O9 K0 a- k8 X; x
5、离心后即使没有明显白膜层,也会有明显的三个分层,上层为生理盐水和血浆混合,中层FICOLL层,下层血细胞。白膜层就在中层FICOLL层中,即使没有明显分层,绝大多数单个核细胞也是在这一层中,如果没有明显分层,可以把这一层液体全部吸出来,再离心获取单个核细胞。  p% P9 ]  m$ z5 X6 P2 Y
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沙发
发表于 2015-3-11 14:38 |显示全部帖子
你用的多少毫升的离心管?先把最上层吸出来弃掉,再吸中层,白膜层以下、红细胞层以上的这一层要保持在0.5公分左右即可,这样可以尽量减少细胞损失,也不容易引入其他杂细胞,效果很好。
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