分离单核细胞时，如何吸取白膜层？

cloudycity

1.首先确定你的血样和ficoll是同一种属的吧。不同种属血样的密度不同，ficoll的密度也不同，分离效果也不一样的。
+ ]" J4 ~6 i) {1 l+ t& n, c2.国产的，应该也可以，以前我都使用tbd的，效果比一些进口的还好···如果不行就换其他牌子，还有，离心的时候，一定要无阻力降速，就是把降速调低，以免降速的时候，又把血荡混了。
; e7 o+ X% o% D3 y  s% J3.你的血样来源？你的血样有多少？血样是否新鲜？是不是太稀了？不新鲜的血，有凝块也分不好，比较好的就是血加上去后，自然沉降时红细胞是像细雪一样的均匀，很漂亮的，而不要有凝块。基本上全血1：1用pbs稀释，然后50mL离心管内含15ml ficoll 再加30ml稀释过的血液，1800rpm 20min升降速都调低，应该都会很明显的。外周血会好分一点，脐血的话可以用羟乙基淀粉先沉降红细胞1-2h，然后取上清再分。6 ~' N% {- _5 x) _
4.如果实在不行，你就估摸着，50ml离心管，白膜大概就在15ml刻度的位置，你把上下2.5ml刻度的液体都吸了。

cloudycity

回复 lxy07 的帖子6 w/ D; O9 V; u* v3 U; w( c

, b, b9 S3 ~9 R. }; V没什么必要···个人觉得，只是追求技术上的完美···哈哈

cloudycity

你具体的操作是怎样的？
( O" ~( P1 C& U6 W5 ]& N' {3 X血液如何稀释？在ficoll上铺血铺地好不好？血和ficoll的界面有没有被弄乱咯？如果都做好了还不明显。那就是太稀/血不行····0 g1 W8 x7 ~0 M. m

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