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Sakya 发表于 2013-1-17 14:06

关于细胞周期时长检测

各位大侠，如果我想检测某种组织细胞细胞周期G1，S，G2，M四个期以及整个细胞周期的时间长度，请问需要采用什么实验技术？

knowtumor 发表于 2013-1-17 20:53

经典的方法是，H3-TDR一次性标记，定时连续取材。制备切片，放射自显影。计数被标记的有丝分裂像的百分数。连续作图便可计算出。

FACS不能测。

Sakya 发表于 2013-1-18 12:42

好弄吗？用核素标记核苷酸？

knowtumor 发表于 2013-1-18 14:35

80年代和90年代初的时候H3-TDR还很多人用。现在恐怕没人用了，谁还卖？

Sakya 发表于 2013-1-18 17:09

现在人们用什么方法检测细胞周期时长呢？？？

knowtumor 发表于 2013-1-18 21:04

It is a lost art.

Sakya 发表于 2013-1-18 22:56

楼上能帮我设计一个简易的测定细胞周期时长的方法吗？

knowtumor 发表于 2013-1-19 08:14

H3-Thymidine 可用BrdU取代。

比如小鼠肿瘤，一次性注射BrdU,间断取材。30 min, 1hr, 2h, 4h, 6hr,12 hr,24h, 48hr, 96h; 肿瘤的细胞周期偏长，一般在20-100hr。有超过100hr的。

将各标本制备石蜡切片，免疫组化做BrdU染色。计算Mitotic figure中BrdU的阳性率。做动态曲线图，可计算出。

Sakya 发表于 2013-1-19 09:42

thanks

Sakya 发表于 2013-1-19 09:51

能不能把现在的流式细胞仪改进一下，让它可以测定细胞周期各期时间长度？

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