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查看: 63231\|回复: 11	go 关于细胞周期时长检测 [复制链接]

Sakya

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楼主

发表于 2013-1-17 14:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

各位大侠，如果我想检测某种组织细胞细胞周期G1，S，G2，M四个期以及整个细胞周期的时间长度，请问需要采用什么实验技术？

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沙发

发表于 2013-1-17 20:53 |只看该作者

经典的方法是，H3-TDR一次性标记，定时连续取材。制备切片，放射自显影。计数被标记的有丝分裂像的百分数。连续作图便可计算出。7 {! @7 ]; [4 z9 c& e1 U* Y7 ~. R5 g f

FACS不能测。

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Sakya

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藤椅

发表于 2013-1-18 12:42 |只看该作者

好弄吗？用核素标记核苷酸？

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knowtumor

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板凳

发表于 2013-1-18 14:35 |只看该作者

80年代和90年代初的时候H3-TDR还很多人用。现在恐怕没人用了，谁还卖？

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Sakya

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报纸

发表于 2013-1-18 17:09 |只看该作者

现在人们用什么方法检测细胞周期时长呢？？？

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knowtumor

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地板

发表于 2013-1-18 21:04 |只看该作者

It is a lost art. ; I; C d2 O2 I

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Sakya

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7楼

发表于 2013-1-18 22:56 |只看该作者

楼上能帮我设计一个简易的测定细胞周期时长的方法吗？

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knowtumor

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8楼

发表于 2013-1-19 08:14 |只看该作者

H3-Thymidine 可用BrdU取代。
) R! {! Z" Q h2 [
比如小鼠肿瘤，一次性注射BrdU,间断取材。30 min, 1hr, 2h, 4h, 6hr,12 hr,24h, 48hr, 96h; 肿瘤的细胞周期偏长，一般在20-100hr。有超过100hr的。& L$ W/ G" t: @- @. t. h N
. X. w/ S" |: Q* B5 G
将各标本制备石蜡切片，免疫组化做BrdU染色。计算Mitotic figure中BrdU的阳性率。做动态曲线图，可计算出。
$ {% ^6 E* @/ v" X8 Z5 ?" G