胶回收的问题（续）

wwy551

上个帖子没法在回复中贴图片，所以新发了个帖子。还请版主见谅。! n( j6 i$ l  l/ s0 R3 T* d* `
如图，左边五条带是摸不同退火温度扩出来的，后面的一条是切胶回收后的电泳结果，应该不是降解，也应该不是PCR产物没跑开切到杂带，毕竟两条带差挺远的，而且我切胶切得很薄，五条带一共切了0.1g。

wwy551

回复 452359357 的帖子8 z' o1 n* j3 b

- z/ P) \) S* ]* s  X. D其实我并不觉得是降解，如果是DNA降解的话，不太可能降解出来这么单一的一条带，而应该是很杂乱的拖尾什么的。
. _* F* U1 \, E" C8 C. `7 j而且由于之前PCR用的primer就是基本卡住基因的起始密码子和终止密码子，并没有考虑到做巢式PCR，所以很疑惑用PCR产物做模板能不能扩出目的基因

wwy551

回复 LuXK 的帖子" k9 F* E' C- S
5 m; x/ o7 C) \: |' h! ~: t
不知道你两次用的洗脱液是不是相同。我以前出现这种问题很可能是因为我洗脱柱子上的DNA的时候用了DEPC处理过的水，这个是酸性的。洗脱下来的DNA跑胶，很可能因为DNA本身和电泳液之间PH值相差很多，跑出来看似不正常的大小。