关于matrigel的问题

bubble_w

我铺的matrigel是1:20稀释的，铺完之后在镜下观察，会看到很多纤维还有类似杂质的黑色斑点，请问各位战友有否遇到相同情况。事先说明一下，溶胶、配置等过程完全按照操作手册，冰上操作，所有耗材预冷。

pailishi

应该没有

shuishan

偶尔看到黑色斑点，但是不影响细胞贴壁生长。
& ~, K$ b8 R( \

开心果王

不知道你说的是不是类似于纤维样的物质，matrigel铺完后会有一层薄纱样的物质包被在板子表面上，比较均匀，操作不当会形成大块的胶聚集物，肉眼都可见。如果你都是按说明书来的话，应该是正常现象。

chentian820

这是很正常的，我的也是这样，hESC在长得没有任何问题。

bubble_w

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$ {9 K& R" A% u2 [( i$ i* ^9 U7 j* q* y! m7 }5 K
我直接把hESC复苏在上面，用的是mTeSR1，干细胞复苏48h后基本没怎么贴啊。

bubble_w

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3 d! I( S: u( s& d5 L# P
8 j: D2 E1 V+ y2 ^feeder cell复苏在上面感觉有点皱缩，不知道是不是有影响。

bubble_w

再问个问题。matrigel最多可以多少比例稀释？1:50？

也行天下

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' m4 I7 Q/ L& C8 R( e+ H4 F: ]7 @! J2 ~/ i; w9 \
我们养hiPS细胞，matrigel1:80稀释，细胞贴壁和生长都没有问题。4 E+ F: @; \- l7 W0 c( H
稀释Matrigel胶的时候，除了按操作手册操作以外，还要注意速度要快。

chentian820

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% d' U; e  J8 r! _9 N) O4 R+ f  m& o' K' a
你的干细胞种子不好，一般复苏效率在10%左右。可能你的就没活的种子