求助！玻片细胞贴壁问题！

Tim

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     我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！ 希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

jhu132llh

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接种的问题
) I" ^1 _0 r0 F  l: _, A& c接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞
. R  ]) a4 L% x  E+ w3 w1 ], j; |3 d因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

quge_00

0 Q& ]* N' X; q4 c+ M
6 v- Q; m! D" C% K2 ?; z回复 Tim 的帖子9 e+ P3 O1 k/ h

# Z: ]! |% E6 t; z1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；
& ^  A& S7 g( u! ]9 K' R2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；+ a2 j+ ]4 S) ^. V
3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，0 k& R! [3 j  l: q" E
小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间" L; ^! n" y0 q4 x* w7 T
（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）
5 u; `, V4 \4 B8 N( l) y4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

Tim

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% e* J* u) Q; r& V方法极好！非常感谢！

小渝

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我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

Tim

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这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

小渝

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  Q, w! f7 Q/ h0 A& }% V2 T1 N! R! }2 r4 G  j6 k! q( `4 x5 U( Y
不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了