求助！玻片细胞贴壁问题！

Tim

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     我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！ 希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

小渝

回复 Tim 的帖子3 |. O3 m. R9 R4 q: u7 {

1 p  @4 h; ~5 a& I4 E+ ?不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了

Tim

回复 小渝 的帖子2 [) a6 h1 N6 i+ c, D

! y2 r9 u1 b7 I! c9 s1 g: q$ V这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

小渝

回复 Tim 的帖子: i: S2 h8 L1 Y2 u' u
# ?3 C: n( L2 }
我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

Tim

回复 quge_00 的帖子
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方法极好！非常感谢！

quge_00

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# ~! _" ^8 u$ @& Q# l0 \) p回复 Tim 的帖子
( n$ J& Y" k% }. p3 e! Q; ~& t) s
- p+ b' u: T. @* k% m" [1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；. m6 G* @4 V6 j% z3 m" ?
2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；
2 i. p! e# d6 N0 A3 p- n3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，
; R8 f+ h5 h9 ~- P8 R小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间" E% J  A+ j9 A) f9 G% t
（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）
% i/ w. [* T. R$ u/ u  b. j  b! v4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

jhu132llh

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接种的问题7 Y5 S# d0 z3 p7 I
接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞
0 b8 g) k& g- a! r; Z3 B因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的