实验室想测正常人全血中CD34细胞的含量，具体方法

Demon_CN

我们做过两次实验，一次是只标记CD34
4 p0 }9 E& Q. B8 C( ?) d具体是加20ul抗体+50ul全血，染色15min，
: P3 q: v9 o/ [然后加溶血素450ul避光10min% A! T8 B* S7 M1 Z$ H+ X
加PBS1ml，洗两遍
+ c1 R+ w! V5 N做出结果居然能到20%多
; {& L# P/ x. s2 b/ \后来经BD试剂公司建议再用CD45划门
3 K' R' b7 j/ k具体是加20ulCD34、CD45抗体加50ul全血
# f  K: }  |* [' s$ H) C% i9 r然后加溶血素450ul避光10min
0 ^: c$ @, e! x加PBS1ml，洗两遍  @* ?* R; j; y$ J$ |, C+ {2 ~
结果还是偏高很多，求指导

lyj-0017

个人感觉应该先溶血之后再与抗体孵育，直接用全血与抗体进行孵育再溶血（即使清洗三遍）可能会增加非特异性结合吧？

穿越地平线

可不可以发给我一份外周血流式的PROTOCOL，万分感谢！

yqbter

抗体的浓度是多少？; P- I8 T+ e+ z7 p( `
20ul好多的！