EB不贴壁

ligangtiancai

如题，本人在做小鼠iPS的悬浮EB三天后将其转入6孔板中（预铺明胶过夜），第二天晚上去看都还没有贴壁，心想估计是培养基太多的问题，结果今天早上去看了还是没有贴，请教有经验的朋友这是什么原因，是培养基太多还是细胞状态问题，或者是板子问题？谢谢！

lingminliang

你可以试着改变培养基的量 或者是换成其他的板子 或者是改变基质 例如PDL或者是Lamin做一下对照 就能找到是不是细胞状态的原因了
& I! V: }4 b( j; m

ligangtiancai

回复 lingminliang 的帖子
& X5 \4 e3 F. d( T
& r/ f1 f0 A$ z好的，请问你在EB从悬浮转至贴壁培养板中时，是一个一个EB转的还是统一一起吸了转移，一起处理会不会对EB形态产生影响？

lingminliang

一起吸了转移,影响不大

shangchunhua

回复 ligangtiancai 的帖子
+ u+ m: [' s: h6 \- C
8 p9 Y3 F- |+ l& a; `5 N) M: _! I+ c你的EB的状态怎么样啊？如果球形边缘有很多死细胞的话，EB就很难贴壁了

cailand

回复 ligangtiancai 的帖子
) b  P4 L% K' o- [% N: F( w4 N, n3 U5 V* e1 z5 o: H
肯定跟培养基量没关系，EB3天挺大挺重了，很容易自然沉淀的

ligangtiancai

回复 shangchunhua 的帖子
6 g" i8 ?7 f; [; R9 Y
. d, ~0 ]; e, Q0 |7 {0 G3 j是有死细胞，边缘感觉不平整，这是什么原因呢请问？

shangchunhua

回复 ligangtiancai 的帖子
! M6 Z& i9 W: h4 M
  S# Z: `# z; i% k可能是营养不足，或是被污染了，ES的质量也很重要

ligangtiancai

回复 shangchunhua 的帖子
: s" Z: k! H8 p6 j; W6 ]. _* i2 l* U6 r4 G
营养不足应该不会，因为相对于培养基而言细胞量比较少，污染的话我也再考虑，但是也不敢确定，培养基也没浑。会不会是因为iPS在诱导EB前已有很多分化的细胞影响了EB的状态呢？