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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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发表于 2013-7-23 22:37 |只看该作者
这几个比例每个公司都有自己的体系,体系一般固定不变,但这几种质粒在大提时想得到高质量的质粒有些困难,Mage、MN的试剂盒都试过,也不是很理想。每一批次的质粒质量直接影响每一批次慢病毒包装试剂盒的质量,必要的时候根据定量PCR的数据效果,会尝试稍微改变体系,这是一件很费时费力的事。
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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 Dancmacabre 的帖子1 G& t& P1 o4 d$ ?# u/ W

3 \- Z/ t) A- N. p8 |% j- w你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
* C. P! A; ?  i% q0 i+ A; k
5 M4 ]6 i4 Q. ]) N9 T7 }否则他会看不到' a; I1 h3 }' g& B

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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 翱翔的鱼 的帖子
0 s; A8 K6 d4 n# j- I  w
, M/ @9 u! V9 W5 o5 ~8 ^# _看31楼

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发表于 2013-11-7 13:00 |只看该作者
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这套系统我也在用,在包pCDH miRNA时,效果很不错,浓缩后滴度可达8次方。: L( L4 y7 h  _# l0 H* \3 I
但是包装pLVX时效果则很差,不知道是不是兼容性不够好。
1 ]) e: J& b7 A9 y+ W9 b* d) D我觉得pLP2的量不能太少吧?因为Rev不仅要带入核,还要允许pLP1上gagpol表达,个人觉得5:6:5:4是不是比较合适~
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发表于 2013-11-19 16:31 |只看该作者
回复 sj03572001 的帖子6 \, k4 {* _0 ^

4 V9 S- n5 V7 T. P2 H. o一点问题,. S8 E+ u  Q4 d* a* `1 O: H
06NP里的质粒质量比例 transfer:pMDL(gagpol):pRev(rev):pVSVG= 270:176:68:95
" @8 g" E% Z: r6 D- V
! x( m$ v5 p, t, ~- N7 m如果考虑各质粒的大小改为mol比的话,我算了一下大概是=34:20:16:16
2 Z6 d! y# z: z* \. E* K3 }, `也就是说,表达质粒与包装质粒的mol比例为=34:52 约等于 2:3+ D3 w) S4 J% Z  `7 z8 n# |( q

/ {* @1 z& d6 m" F我一直困惑所谓的比例是应该按质量还是mol计算。
4 [+ a# M& b5 I
6 `2 R* [% f6 [' N/ ?7 ]3 Q. g还请高手们解惑,=)拜谢了~
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发表于 2013-11-19 20:43 |只看该作者
还有一套包装系统PSPAX2+PMP2G跟这个包装质粒系统有什么差异
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小小研究员

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发表于 2013-11-20 08:07 |只看该作者
回复 shermin 的帖子
% N. ?" Z& n2 o& |% m5 [4 p, [% Q4 t2 x. P' o* H
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发表于 2013-12-7 21:21 |只看该作者
1:1:1:1出来的效果不是很好啊
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发表于 2013-12-26 11:28 |只看该作者
我也想知道哪种比例效果最佳,求高手指教

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小小研究员

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发表于 2013-12-30 01:19 |只看该作者
回复 zje6265610 的帖子+ q1 `/ O' V# B

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