得到EB之后，如何向神经方向诱导？

jessewill

我看到了有人用ITSFn培养基筛选，有人用RA诱导，: {! S  R! H2 u/ m4 `  ~* a9 i
但是这两种东西我们实验室目前都没有。。。% M8 g% C  p, n2 g0 p9 [, ^% S) E" s
我在想能不能用DMEM/F12+Neurobasal+N2B27+bFGF来诱导向neural stem cell分化。。。感激不尽

lingminliang

以前用过 不过记不太清了 好像只用用DMEM/F12就行了

开心果王

如果只是简单的鉴定向神经分化的话，用N2B27可以的，我用这个培养之后，tuj1和gfap阳性的细胞都有！不过我在加bFGF时，容易使贴壁的团块隆起。

jessewill

回复 开心果王 的帖子# P6 L0 _9 d2 N, E( E

+ [. @$ W7 O# i隆起说明什么呢？增值过多？瞎猜啊

开心果王

我也没想明白！就是细胞团块一部分细胞不再贴壁了。卷起来了，看着就像隆起来了，感觉是bFGF和EGF改变了细胞的外基质，也可能是个案，楼主可以试一试先！

dianying

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1 l6 L6 G0 k, o3 }2 s6 l2 A6 P* O" G  r5 U. c
你用的gGAP是哪的呀？你培养了多久就能有表达了？你的bFGF 的浓度是多少？有团块隆起的细胞照片吗？
" V7 O* h9 F& N" e! x; q& @0 K不好意思，问题多了点。--谢谢

开心果王

悬浮培养了6d，后贴壁了6-7d就固定做IF了，团块隆起倒没记录下来，抗体是别的实验室惠赠的，sigma，货号就不记得了！

dianying

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/ [1 A* k2 g; @* N* K
" @, y+ y6 [$ A+ j8 z5 L1 [, [8 u听起来你染的是rossette？你确定在rossette stage有gFAP 表达吗？

dianying

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$ W0 z2 ]6 Q5 y1 s  c$ H7 z
# U( l# w8 T6 ?- I6 p! E你得到EB以后，可以让它贴壁挑出rossette,再到npc，之后在诱导分化--这是一条老路。' I4 T$ F+ A" N4 l/ Y, z/ G; Q0 h
你的思路也不妨一试，试验都是摸索中来的。. x2 B5 R3 A' a8 _9 F/ d
现在也有人在用特殊的培养基直接能拿到npc，这条路省时间，但是费钱。