Cell stem cell最新文章：Highly Efficient miRNA-Mediated Reprogramming

snokey

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个人很不看好这篇文章，感觉too good too be ... 希望将来别的组能重复出来。& E1 d/ M/ s4 p; ^# M+ |
第一：做miRNA302/367的Lab太多了，用把这几个microRNA组合起来一起转染细胞，或者用载体表达整个microRNA cluster的工作很多人都做过了，我都知道一个很有Credit的（常有Nature level paper）的组做了好一阵了，没有得到什么非常非常明显的结果。
) k, w( B: N! n第二：关于ES-like 克隆的统计，按文章的统计方法来看，他们得到的人的细胞中的诱导效率差不多为10%（如果我没有理解错的话），我除了惊叹还是只能惊叹。& v4 d( v8 r+ W8 W
第三：VPA的作用问题，VPA的作用其实很大程度上是HDACi-indepent的，个人觉得作者的工作只能部分解释MEF里VPA的作用。) d% A5 K8 A& U3 X  T
第四：现在最流行的就是virus-free系统，病毒表达miRNA302/367可以work，直接转microRNA进细胞不就是virus-free/OSKM-free了吗？8 ^, e, {' i' T/ P* r3 J
第五：哈佛那篇靠合成mRNA高效诱导iPS的文章其实也有类似的问题（too perfect）。据我所知有公司重复了，结果很不乐观，实际上那篇文章真的很难重复。我个人一直有个很大的疑惑，关于Fibroblast转染的问题。众所周知，Fibroblast很难转，做过的人都知道，即使用优化的Nucleofection程序，转染效率不过50%，哈佛那篇用RNAiMAx（其实是弱化版的Lip2000）居然就可以搞定了？（而且是那么长的cDNA） 那样Lonza最有名的产品Nucleofector早就没有市场了。! v+ ]: Q( E) @" y; T) M0 T
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个人觉得这篇文章值得借鉴的地方是找出了一些VPA可以提高诱导效率的解释。
4 h& Z7 y$ q4 e, w2 Z/ T时间/重复是最好的判断标准，希望我的观点是错误的。

snokey

楼上的，你打算重复这篇文章吗？

snokey

昨天同一个大佬交流了一下，基本意见同cicadacjk的一样：假。最初我个人的担心是正对照(4F)用的病毒污染了只转microRNA的细胞。但后来仔细一想：如果只有microRNA诱导效率比3F or 4F低的话我觉得“似乎”有可能，但文章号称10%，我无语了。做过的同志都明白即使用间充质干细胞诱导，能有1%当相当的恐怖了。
  ]. G+ s: o- I% C  n- I9 D  L哈佛那篇我个人觉得基本也是假，只是假的比较巧妙/比较含蓄，泡泡没有那么容易破。这篇泡泡吹得太大了，应该爆得很快。7 D0 |- G, Y! y0 a! }

1 M- ^& j: W# D2 P+ \1 Y另外，个人严重cicadacjk说的“可知国内的文章在国外经受多大的压力”，不止中国人，当年的Yamanaka也是。做过的人都知道OSKM很容易重复，
! [! e# \0 f- j! MLin28/Nanog的那个组合简直就是......。到现在了Oct4/Sox2/Lin28/Nanog还要经常挂上KLF4/cMyc,美其名曰提高效率。呵呵: )
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有件事情一直没说，今天一吐为快：
) [" l3 q2 q0 q* [" E7 W7 hAberrant silencing of imprinted genes on chromosome 12qF1 in mouse induced pluripotent stem cells  (Konrad Hochedlinger)
7 U) s+ ^8 E- M& G! @: tReceived 06 September 2009,  Accepted 17 March 2010,  Published online 25 April 2010 ) v# N1 U' G7 @

$ |- ^1 x% g5 Q; ]Activation of the imprinted Dlk1-Dio3 region correlates with pluripotency levels of mouse stem cells  (Qi Zhou组）9 C1 i) @% x' N+ y- |' J/ Y
Received April 8, 2010. Accepted April 9, 2010.
' P: |# r! a; E1 o5 |( |- g注意时间！ 1 [" o6 a% O0 M# T  q& Z
和国内的组没有任何交集，不认识周组里的任何人，也没有听过任何八卦。但凭我的经验和直觉，特别是看到JBC（Received April 8, Accepted April 9）我想我大概明白了。希望我是小人之心。

snokey

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8 u+ O; A8 l  Y8 T5 O0 X) I; R/ o回复 cicadacjk 的帖子8 R: @5 g+ v4 W+ l

- u2 e/ k1 N1 J8 D# a% L- o兄弟消息很准嘛。Deepa的文章出来了。难道是YM兄？哈哈