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端粒酶pcr产物的聚丙烯酰胺酶电泳图 如何分析? [复制链接]

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楼主
发表于 2010-7-28 01:28 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
下图条带是“从左往右”还是“从上向下”跑出来的?3 S" u3 Q9 ~7 t
如图串珠状的条带是怎么形成的?, t/ O* I4 N1 Z# ^
: a  j+ c: i! G8 c3 P" f
端粒酶活性检测的基本原理 :
4 g, R& N  t7 S* ~9 G5 C/ ]) U# x( `; u利用端粒酶在体外可以以其自身 RNA的模板区为模板,在适宜的寡核苷酸链的末端添加6个碱基的重复序列的特性, 采用PCR方法扩增此重复序列, 并进而用聚丙烯酰胺 (PAGE)凝胶电泳显示 6 个碱基差异的梯带。9 ^5 [1 `  p% C9 {
2 S2 H4 Y/ O, ]" Y0 u" q- @# c) i
TRAP assay showing that the cells had high telomerase activity. # s9 z% S0 M- }3 E0 Y
lane 1, F9 cells (ATCC, positive control); * Z$ G' q8 q% I. r/ D! f
lane 2, FGSCs; * O9 g" e9 G& H* I" e7 c
lane 3, STO (negative control); ' y5 R. \+ }; m
M, MRK400 Genescan ROX ladder. 7 o- }. S# u# J3 J# g* `

$ |! T0 R# ~8 s6 ^8 j9 a* jThe data shown are representative of four experiments. 8 [6 _7 F/ ^1 j2 e/ T% W2 [5 e

6 M8 _: U9 F* G2 s  I- r5 o
( ~2 n; f/ f* `5 f+ F图片来自文章Production of offspring from a germline stem cell line derived from neonatal ovaries
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沙发
发表于 2010-7-29 21:28 |显示全部帖子
回复 3# hawkyiger
0 `  M! h- D' `7 z- U6 t& c: W: h
   你看看我这样理解对不对:
$ G# Q. s1 O( r; i  端粒酶活性越强,逆转录的DNA越长。如lane1 & lane2 跑在图片最低端的片段是端粒酶合成过程中的片段,其最长能够合成到如图160nt的产度。7 p2 i& W; G2 D4 l
  如果图片没有拖尾,则将是如下的电泳结果:
3 o0 Z+ A0 D8 F: Z    -      94nt
2 @" m$ [: x& w0 a' b% Q9 b! D    -      88nt: ~* v5 Z% [/ o& t3 c$ Y) s' ~
    -      82nt' W6 G+ a& J8 V0 ^2 W+ d* b7 w2 O
    -      76nt" L6 b' @- B+ J3 ?5 e
    -      70nt
3 [" Q& k. ?; W电泳带 marker
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