脐血MSC和红细胞裂解液的讨论

mbpsky

请问一下战友们
7 `1 O  y* b, A: S+ ?你们分离MSC时脐带血用红细胞裂解液吗？: q% j6 [) M0 x! `8 u8 z0 x
请用的战友介绍一下配方和用法
+ D0 |+ a; r1 S, {# ~先谢谢了！

echo

养间充质的时候，不用裂解液也可以的。脐血分离后红细胞是挺多的，但是直接贴壁来养间充质没有什么问题。

mbpsky

回复 2# echo / a, v  }* z5 L" ?
6 Y& e! O& G" l

/ ^$ b: P, y. O. @$ x7 z* C7 J6 P    直接贴壁效果不好吧，细胞不纯...尤其是脐血的..都是幼细胞，贴壁能力也很强的

Robert-A

养MSC不用裂解液，如果你想用的话可以用氯化铵或高渗氯化钠都可以的

echo

回复 3# mbpsky
* N: g3 g! z; e, y& H" f  Y$ K/ p/ M' V: ~% L  `
! p! M9 I" h, U7 I8 Q: k
    摸索换液时间应该还可以。

willow0711

回复 Robert-A 的帖子( K. l1 y4 Y% q/ w' f+ [

. @7 g& ?, v% x1 X7 D你好，请问你说的氯化铵或高渗氯化钠的具体浓度是多少？怎么配置？作用是多长？谢谢

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓还低

金戈

氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）
. x( t% F6 ?8 M& t& x& K% k: C5 [) F80.2 g NH4Cl (1.5 M)
2 `: t' p: e4 d, a- C# |% v# D$ v- m8.4 g NaHCO3 (100 mM)
; @7 y1 ^& M3 x3 B- a5 r3.7 g EDTA二钠 (10 mM): |3 P! E* H9 c' e% I: E, Y
加水至900ml，然后用1N的HCl或1N的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。
6 d! h6 R2 w0 u% `1 K6 [) ~该10×的储存液可在4℃保存6个月。
, u+ k9 S" A) ^7 X/ K! v工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓的还低，所以有可能会分离不成功。

jxaf3900824

可以不用红细胞裂解液，贴壁生长挺好。4 W! `2 T6 P( q5 Q" A. Y