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本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑
1 I# \0 H1 ?2 E* j% |- @
0 L3 k1 n- n9 u+ b" ^3 m JRT,9 t3 @; z5 j4 \3 N- d
0 d6 Q0 q9 C$ V2 q: g9 G. b新收获的人源脐带MSC,P5,按照相同的工艺和操作收获以后,用台盼蓝染色测活率,偶尔95%+,偶尔只有80%左右,请教论坛里的各位大神,可能的原因??
0 A* H! u$ i8 l& ^+ Q o大致的操作如下:
3 L2 R2 o1 R" z+ _; ^7 p p冻存的P4融化,大约8000/cm2培养至90%融合,
7 N: S9 n% n. y9 F s3 l2 |8 I4 k倒掉培养基,0.9%NaCl洗一次& K& I+ J% e i
加trypLE消化,吹打过滤! c5 z: S7 ?+ k0 c/ q* Y
取样计活率; v( P& d- q9 c4 `$ g% U, k' o; p
3 T' t. @) ` N+ H8 b; x这里面P4的冻存细胞是同一批,操作人都是熟练工,试剂批号短时间内也没更换过,
% A3 s; l+ O2 ]3 m4 W- f即使同一批接种的细胞,分上下午收获也有比较明显的活率差异,所以苦苦百思不解
; _: }& ~$ `0 V4 r; |
9 C8 R7 g, H3 V, |目前看出的规律是:总体活率不高的时候,细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团,这样的细胞团里大多是死细胞,至于为什么会产生这样的死细胞,还是想不清楚 |
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