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[请教] 有关细胞收获以后的活率 [复制链接]

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包包
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

楼主
发表于 2018-5-18 10:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 baby00000003 于 2018-5-18 10:43 编辑
1 I# \0 H1 ?2 E* j% |- @
0 L3 k1 n- n9 u+ b" ^3 m  JRT,9 t3 @; z5 j4 \3 N- d

0 d6 Q0 q9 C$ V2 q: g9 G. b新收获的人源脐带MSC,P5,按照相同的工艺和操作收获以后,用台盼蓝染色测活率,偶尔95%+,偶尔只有80%左右,请教论坛里的各位大神,可能的原因??
0 A* H! u$ i8 l& ^+ Q  o大致的操作如下:
3 L2 R2 o1 R" z+ _; ^7 p  p冻存的P4融化,大约8000/cm2培养至90%融合,
7 N: S9 n% n. y9 F  s3 l2 |8 I4 k倒掉培养基,0.9%NaCl洗一次& K& I+ J% e  i
加trypLE消化,吹打过滤! c5 z: S7 ?+ k0 c/ q* Y
取样计活率; v( P& d- q9 c4 `$ g% U, k' o; p

3 T' t. @) `  N+ H8 b; x这里面P4的冻存细胞是同一批,操作人都是熟练工,试剂批号短时间内也没更换过,
% A3 s; l+ O2 ]3 m4 W- f即使同一批接种的细胞,分上下午收获也有比较明显的活率差异,所以苦苦百思不解
; _: }& ~$ `0 V4 r; |
9 C8 R7 g, H3 V, |目前看出的规律是:总体活率不高的时候,细胞悬液里会有被DNA缠住的细胞结团,这样的细胞团里大多是死细胞,至于为什么会产生这样的死细胞,还是想不清楚

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沙发
发表于 2018-5-18 10:53 |只看该作者
新收获的细胞不太可能低95%啊

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藤椅
发表于 2018-5-22 09:20 |只看该作者
有可能消化过度的问题,一般培养收集的干细胞活率很高的

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板凳
发表于 2018-5-22 11:14 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
也可能细胞有污染

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报纸
发表于 2018-6-3 12:09 |只看该作者
本身台盼蓝测活率也是有差异的,但是两次差别那么大只能是消化过度的原因,至于本身活率不高应该是冻存过程的问题,一定要梯度降温

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地板
发表于 2018-7-30 13:33 |只看该作者
不同厂家培养基培养出来的干细胞对胰酶消化作用不同
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