讨论去除PBMC中少量红细胞方法

只因偶然

近期，提取的PBMC中含有少量红细胞，请问大家有什么好的方法去除红细胞，不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。

聂晨飞

建议用分离液再分离一次，裂解液虽然效果显著，但对细胞伤害较大。后期换液时候，低速离心，也有效果

yanxm920

在分离PBMC时，有时会带有少量红细胞，其实红细胞对后期细胞的生长影响很小，可以忽略不计的；如果实在是追求完美，就比学勇红细胞裂解液处理，比较好用的是红细胞裂解液，品牌：Solarbio | 货号：R1010，可以试着用一下，仅供参考！

吕小松

将白膜冻到-80℃ 48小时后再复苏，离心，红细胞都离出来了，而且不会多么影响白膜的质量

ltickp

TBD，破红后清洗两遍对后续的培养没什么大的影响

阿秀哥

多少会有点红细胞混在一起的，如果不是太多就不用担心，不会影响细胞的后期生长。如果太多的话，可以用ficoll再离一次

淘知路遥

做流式检测可以用。大都时候在白膜层很明显时，只取白膜层也会有少量红细胞，有些人白膜层本身就会混一点红细胞或者其他白色不溶物，少量红细胞不影响培养，个人不推荐用红细胞裂解液，国产比较出名的有天津灏洋、碧云天。

紫风铃9897

rzghc 发表于 2017-7-7 13:26 2 c5 b1 C& x& M/ I5 T
先hes沉降后ficoll分离

, l: w( U' C2 X
MARK先

jxsese

我们一般都是用注射用水吹打，严格控制时间，大概可以去掉一半的红细胞，这是个人经验。

rzghc

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5 ^  d2 n0 B% r1 ^! M/ ~6 r; _是费点时间，不过效果还是不错的