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讨论去除PBMC中少量红细胞方法     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-7-7 09:49 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
近期,提取的PBMC中含有少量红细胞,请问大家有什么好的方法去除红细胞,不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。
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沙发
发表于 2017-7-7 10:31 |只看该作者
吸取白膜层的时候尽量慢慢吸取,不要吸到红细胞
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藤椅
发表于 2017-7-7 11:17 |只看该作者
回复 只因偶然 的帖子
1 K( \6 s7 m( i  K, q$ p  Y( D5 ?9 n8 h: q. @) _
用裂解液后期长不起来的,用分离液再离一次试试,或者后期长起来后用注射用水裂解试试
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板凳
发表于 2017-7-7 11:38 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 只因偶然 的帖子4 `$ D$ Q; I, S2 W
7 [3 Y9 L( L( K; B
试一试高渗与低渗的PBS,先用1.8x的PBS处理几分钟,再用等体积的2.2x的PBS中和,然后离心。处理时间以及回收率就需要用你的经验把握了。
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报纸
发表于 2017-7-7 13:26 |只看该作者
先hes沉降后ficoll分离
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2017-7-7 14:06 |只看该作者
1.上ficoll是用盐水充分稀释
1 |" n* m) ~4 S8 w7 _2.离心降速时减少震动。2 _/ _+ `/ g3 g" o9 {  J' y
3.吸白膜层时要轻柔。
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发表于 2017-7-7 14:10 |只看该作者
再上一次ficoll即可
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发表于 2017-7-7 14:28 |只看该作者
如果不是使用适合的分离液,并掌握好恰当的离心力和离心时间等,基本上都会有一点红细胞。要完全去除基本上只有用裂解的方法,裂解液或低渗的方法
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发表于 2017-7-7 16:25 |只看该作者
回复 王宏伟8901 的帖子3 t  l" ]; h( \( |: P! e% y
2 I6 f. @0 T! o2 \
红细胞跟白细胞混一起了
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发表于 2017-7-7 16:26 |只看该作者
回复 翎宝 的帖子- E3 |; ?/ v$ Y9 W0 c0 L
! }  ]% T' n4 y3 d
所以问是否有好的红细胞裂解液
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