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1125476931 发表于 2017-1-16 14:47
: s0 u( c( m6 c: e0 n6 q! g- C9 }求推荐一种神经干细胞培养基,目前实验室用的培养基细胞长势一般,细胞酶解后离心洗涤,用培养基重悬会出现 ... 9 V% V/ ^: X) w
请问你使用胰酶进行细胞消化的吗?$ k+ X' v# g- z/ Z% M0 f( T
! b8 v2 l& S& `9 J# S就你描述的情况来看,感觉像是消化的稍微有些过,导致有些细胞里的DNA释放出来形成了絮状物质。解决方法有两个:7 x( o) I- {& Q- s$ x n4 M9 H. C( H
1. 如果科研经费不成经费,建议考虑换成Accutase进行细胞消化。3 R; O3 o0 _4 @, H- a) _& T
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2. 可以考虑在消化液中加入DNA酶(具体浓度我忘记了,你可以查一下资料),这样可以消除絮状物l了。
; w3 v( e5 G1 \6 @* x1 e 还有如果是用胰酶消化的话,消化时间不宜太长,消化后吹打不要力量太大。
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此外,神经干细胞不是非要通过酶消化法传代,机械吹打也可以用来进行传代,只是单细胞率不会太高。你可以根据你下游实验的需要,来选择传代方式。0 n9 J% _- A8 Z9 l/ O! |
; f, j9 U4 Z' A. I有问题多多交流。 |
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