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[请教] 细胞复苏解冻问题   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2016-11-7 09:34 |只看该作者 |正序浏览 |打印
最近接收了一批寄存细胞,下了液氮后在做复苏。但细胞冻存液融化的时间接近2分钟了,冻存液的量在1.5毫升,水浴锅的温度调到了39度。不知道各位有什么办法能让解冻时间控制在一分钟之内?
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发表于 2017-7-11 14:44 |只看该作者
冻存液少一点,温度我觉得不要超过37

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发表于 2017-7-11 10:51 |只看该作者
将培养基预热,加一部分进去

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发表于 2017-7-7 16:35 |只看该作者
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cxs 发表于 2016-11-7 10:08
% H8 o7 X% W: y无非就是在水浴里多晃动,如果还是不行,我想主要问题并不在温度,而在于你的冻存量太大了,一分钟比较难全 ...

# S+ ^  K7 h: ]" q这个很实用,谢谢,学习了

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发表于 2016-12-21 20:08 |只看该作者
超过一分钟也没有多大问题的,复苏的时候要求尽可能的快。尽力而为吧。
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发表于 2016-12-16 08:20 |只看该作者
迅速摇晃冻存管就行了,竟可能快,如果还不能快速融化,只能说明你的冻存液加多了,冻存液一般不大于1ml,DMSO含量占10%
1 f7 T) c/ d$ e$ B1 g. F
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发表于 2016-12-15 11:08 |只看该作者
解冻的时候要快速晃动冻存管,解冻还是很快的,另外建议冻存时减少每管冻存液体积,可适当增加冻存密度
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发表于 2016-12-14 14:54 |只看该作者
我们每管冻存1.5ml,复苏时基本也要2分钟。
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发表于 2016-11-18 16:51 |只看该作者
我们冻存的量也会在1-1.5ml,一般是42度解冻,在水里多晃动一下,当解冻至剩下一小粒冰块时,拿出来,用酒精消毒后开始操作,这时冰块已经融了。解冻的时间2分钟以内,解冻后细胞活率也比较高
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发表于 2016-11-18 14:43 |只看该作者
摇晃冻存管,加速溶解,还就是并不是一定要全融,可以融到剩一点小冰晶
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